实验6酸性染料比色法测定硫酸阿托品的含量(学生).docVIP

实验6??酸性染料比色法测定硫酸阿托品注射液的含量

一、目的要求：

通过硫酸阿托品注射液含量测定，掌握酸性染料比色法的操作条件。

二、原理：

2??H2SO4?H2O???(C17H23NO3)2?H2SO4?H2O??694.84

B?+?H+????BH+???????

+?????(BH+?In-)水相????(BH+?In-)有机相

HIn???H+?+?In-

在适当的介质中，如适宜的pH，生物碱类药物（B）可与氢离子结合成阳离子（BH+），一些酸性染料如溴甲酚绿等可解离成阴离子（In-），上述阳离子与阴离子定量结合成的有机络合物（BH+?In-)，即为离子对，并能全部溶于有机相中，过量的染料（In-）完全保留在水中。用有机溶剂提取该离子对，在一定波长处测定其吸收度，即可计算出生物碱药物的含量。或者，将显色的有机溶剂碱化（如加入醇制氢氧化钾），使与有机碱结合的酸性染料释放出来，再测定其吸收度从而确定生物碱的含量。

三、操作步骤

1、对照液的制备

已事先制备好，浓度见试剂瓶。

2、供试液的制备

精密移取硫酸阿托品注射液1.0mL，置10mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。（2个人打开5支安瓿瓶，放于干净的10mL小烧杯中。每人测定时配制10mL样液2份。）

3、测定法

水（空白）

精密吸取?阿托品对照液????2.0mL→置60mL分液漏斗中（4个）→精密加入溴甲酚绿染料

阿托品供试液2份

2.0mL，混匀后→精密加入氯仿10.0mL→振摇提取3-4次后（注意放气），静置1-2分钟分层→将氯仿层收集于10mL试管中→加入无水硫酸钠脱水（脱水后，固体呈块状，溶液特别澄清）→移入吸收池中→420nm处测定吸收度。

四、数据记录与计算

注射液按标示量计算的百分含量为：

标示量%?=?

硫酸阿托品注射液标示量%=

本法中换算系数1.027（694.85/676.83）系无水硫酸阿托品相当于硫酸阿托品。

（此处是指硫酸阿托品在注射液中的标示量百分含量），标示量：1mL硫酸阿托品注射液含硫酸阿托品0.5mg。

五、结论

中国药典（2005版规定），含硫酸阿托品（(C17H23NO3)2?H2SO4?H2O）应为标示量的90.0-110.0%。

思考题：

1、酸性染料比色法的pH选择要求是什么？

2、为什么氯仿液要用无水硫酸钠处理后才可进行测定？

3、中国药典（2010版规定），含硫酸阿托品（(C17H23NO3)2?H2SO4?H2O）应为标示量多少？

注意事项

1、实验所用分液漏斗需要事先检漏，涂好凡士林。

2、水、对照液、供试液三者必须平行操作，提取振摇时间和幅度应一致，以保证测定结果的准确性。

3、测定用的氯仿层必须澄清且不含有水珠，注意不要把无水硫酸钠带进比色皿中。

4、紫外分光光度计使用的注意事项。使用的是尤尼柯UV-2000型紫外可见分光光度计。在108室。

⑴仪器使用方法：

A、使用前，调节仪器上面板的旋钮选定需要测定的波长420nm；

B、用所测溶液润洗比色皿3次以后，在装液达到1/2-2/3左右，用软纸将比色皿的四面擦净，才可放入仪器中。用手拿住比色皿毛面，沿着同一方向擦拭比色皿光面。

C、将盛有参比溶液（空白溶液）的比色皿插入第一格比色皿槽中，其余样品溶液的比色皿记好顺序插入比色皿槽，盖上样品室盖。将比色皿拉入光路中（拉杆不动，第一格就是参比溶液），按“100%inc”键调节100%inc，此时显示器显示“BLA”，直至显示“0.000”A为止。然后将其余样品拉入光路进行测量，显示器显示样品A值，记录即可。

(2)实验后，比色皿用无水乙醇清洗干净，倒扣在软纸上晾干。注意不要搞错仪器比色皿，填写好仪器使用记录，打扫好实验室卫生，方可离开实验室。

(3)废液可先倒入废液烧杯，可加少量水封住氯仿废液，待实验后将氯仿层废液倒入废液瓶中即可。

氯仿有毒性，注意眼睛和手的保护。