核酸分子杂交与应用.pptVIP

******************************************************************************************第63页，讲稿共85页，2023年5月2日，星期三**第64页，讲稿共85页，2023年5月2日，星期三**Southern印迹杂交过程1、DNA样品的酶切和电泳2、电泳胶的处理3、DNA的转移4、DNA的固定5、DNA膜的杂交第65页，讲稿共85页，2023年5月2日，星期三**杂交过程1、预杂交：为了减少非特异性杂交反应，在杂交前应进行预杂交，将非特异性DNA位点封闭。常用的封闭物有两类：其一是变性的非特异性DNA，大多采用鲑鱼精子DNA或小牛胸腺DNA；其二是一些高分子化合物，其作用有二：封闭DNA上的非特异位点；封闭膜上与非特异性DNA结合位点。第66页，讲稿共85页，2023年5月2日，星期三**预杂交液的配制6×SSC（1×SSC为0.15mol/LNaCl和o.o15mol/L柠檬酸）5×Denhardt’s溶液0.5％SDS100μg/ml变性的鲑鱼精子DNA