人鼠嵌合型抗人CD19抗体Hm2E8b的研制及功能研究的开题报告.docxVIP

人鼠嵌合型抗人CD19抗体Hm2E8b的研制及功能研究的开题报告

一、研究背景：

人CD19抗体是一种用于治疗非霍奇金淋巴瘤和急性淋巴细胞白血病等恶性肿瘤的治疗药物，它能够靶向肿瘤细胞表面的CD19蛋白，促进肿瘤细胞的凋亡和免疫细胞的攻击作用，从而达到治疗作用。然而，人源化的CD19抗体在治疗中也存在一些不足，例如易产生抗体介导的细胞毒性、免疫原性以及治疗效果有限等问题。

为了克服这些难题，近年来，人鼠嵌合型抗体制备技术成为了新的研究热点，其中，抗体的嵌合和人源化可以使其更好的适应人体环境和避免引发免疫反应，同时保留其结构和生物活性。因此，研发一种人鼠嵌合型抗人CD19抗体Hm2E8b，不仅可以提高治疗效果，还可以避免人CD19抗体存在的不足，具有良好的应用前景。

二、研究目的：

本研究旨在研究并开发一种人鼠嵌合型抗人CD19抗体Hm2E8b，通过生物学活性实验、荧光探针标记及其在体内外的抗肿瘤活性检测，评估其生物学活性、稳定性及安全性，为其深入的开发和应用提供科学依据。

三、研究内容和研究方法：

1.研究内容：

(1)CD19基因的克隆及重组抗体分子Hm2E8b的构建

(2)纯化与鉴定Hm2E8b抗体分子

(3)体外检测Hm2E8b抗体分子的抗肿瘤活性

(4)体内实验评价Hm2E8b抗体分子的安全性和抗肿瘤活性

2.实验方法：

(1)CD19基因的克隆及重组抗体分子Hm2E8b的构建：

将CD19基因克隆到原核表达载体中，然后通过酵母表达、亲和层析纯化、在体重组等步骤制备重组抗体分子Hm2E8b。

(2)纯化与鉴定Hm2E8b抗体分子：

使用SDS和Westernblot方法对纯化后的抗体分子进行分析鉴定，以保证其纯度和活性。

(3)体外检测Hm2E8b抗体分子的抗肿瘤活性：

以肿瘤细胞株作为模型，测定Hm2E8b抗体分子对肿瘤细胞活性的影响。

(4)体内实验评价Hm2E8b抗体分子的安全性和抗肿瘤活性：

将Hm2E8b抗体分子注射到小鼠体内，在不同时间点测定被注射小鼠的生化指标并观察小鼠的行为，以评估其安全性。同时通过小鼠肿瘤移植模型实验，测定Hm2E8b抗体分子的抗肿瘤活性。

四、研究意义和预期结果：

本研究如果成功开发出一种新的人鼠嵌合型抗人CD19抗体Hm2E8b，将有望填补这类药物领域的空白，提高治疗效果，降低副作用，为肿瘤患者的治疗带来实际的好处。预计通过体外实验及动物模型实验，能够证明Hm2E8b的生物学活性、稳定性及安全性，并且具有良好的抗肿瘤活性，为进一步的临床应用提供有力的支持。