巢式RT-PCR方法检测CK20mRNA在膀胱癌细胞中的表达及意义的开题报告.docxVIP

巢式RT-PCR方法检测CK20mRNA在膀胱癌细胞中的表达及意义的开题报告

一、研究背景与意义

膀胱癌是泌尿系常见的恶性肿瘤之一，其发生机制及治疗方法一直是医学领域研究的重要方向之一。CK20是一种细胞角蛋白，常常在消化道上皮细胞和膀胱黏膜中表达，并且在膀胱癌中表达升高。因此，CK20被认为是膀胱癌的标志性分子。RT-PCR是一种非常敏感特异的检测分子的方法，可以分析在细胞和组织中特定靶分子的表达情况。巢式RT-PCR是一种PCR扩增方法，可以有效地避免PCR扩增后的非特异性产物，从而提高检测的特异性和灵敏度。因此，应用巢式RT-PCR方法来检测CK20mRNA在膀胱癌细胞中的表达，具有很高的临床应用前景。

二、研究内容及方法

研究目的：利用巢式RT-PCR方法检测CK20mRNA在膀胱癌细胞中的表达情况，并探究其临床意义。

研究方法：

(1)收集膀胱癌组织标本，并提取总RNA。

(2)用逆转录酶将RNA转化为cDNA。利用cDNA作为模板，PCR扩增CK20。

(3)通过膜上杂交和荧光定量来检测PCR产物。

(4)应用临床病理学的方法对膀胱癌组织的CK20mRNA表达与膀胱癌患者的肿瘤分级及预后进行相关性分析。

三、研究意义与创新点

(1)利用巢式RT-PCR方法检测CK20mRNA在膀胱癌组织中的表达，可以为膀胱癌的早期诊断、分子分级和治疗提供参考。

(2)通过探究CK20mRNA在膀胱癌组织中的表达与患者的肿瘤分级及预后之间的关系，不仅可以为膀胱癌患者的个体化治疗提供指导，还可以为膀胱癌的生物学机制研究提供新思路和新证据。

(3)本研究采用的是巢式RT-PCR方法，该方法可以消除非特异性PCR产物的干扰，提高检测的特异性和灵敏度，具有创新性和前瞻性。

四、参考文献

(1)LiuZY,WangY,ZhangHY,ZhouL,WangXL.CorrelationbetweenCK20mRNAexpressionandpathologicalcharacteristicsofbladdercancer.ChineseJournalofUrology,2004,25(7):452-454.

(2)ZengSQ,HuangYF,LinWY,WangXJ.DetectionofCK20mRNAexpressioninbladdercancerbynestedRT-PCR.ChineseJournalofClinicalOncologyandRehabilitation,2006,13(2):166-168.

(3)ZhuYZ,LiXH,LiR,HuangYF.ExpressionofCK20mRNAinbladdercanceranditsclinicalsignificance.JournalofClinicalandExperimentalPathology,2009,25(5):491-494.