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第四节微生物细胞工程;第四节微生物细胞工程;第四节微生物细胞工程;一微生物细胞融合;一微生物细胞融合;;〔二〕影响微生物细胞融合的因素;〔二〕影响微生物细胞融合的因素;二原核细胞的原生质体融合;二原核细胞的原生质体融合;〔一〕PEG融合示意图;〔二〕G+细胞融合的过程;〔二〕G+细胞融合的过程;〔三〕G-细胞融合的过程;三真菌的原生质体融合;三真菌的原生质体融合;;三真菌的原生质体融合;融合技术要点;〔一〕酵母的原生质体融合;;〔二〕霉菌的原生质体融合;1.霉菌原生质体融合方法;〔2〕原生质体的别离、再生和回复;〔2〕原生质体的别离、再生和回复;〔2〕原生质体的别离、再生和回复;〔2〕原生质体的别离、再生和回复;〔2〕原生质体的别离、再生和回复;〔2〕原生质体的别离、再生和回复;2.种内原生质体融合;异核体开展产物有以下几种。

①形成异核体和偶见的稳定二倍体——曲霉和青霉属的一些种是这种异核体的典型代表。

②形成异核体和常见的短暂二倍体——顶头孢霉在原生质体融合中容易产生高频率的异核体，但异核体极不稳定，只别离到极少数杂合原养型茵落，二倍体阶段相当短暂，迅速发生染色体别离；赤霉素产生菌具有类似情况。;〔2〕原生质体融合和重组;〔3〕原生质体回复;不管近亲或远亲的种间原生质体融合，其频率比种内约低5个级数。融合产物及其性质可能有以下几种情况：

①形成异核体和二倍体：构巢曲霉和皱孢曲霉，其融合产物表现为构巢曲霉种内融合产物的各种特性。;②形成异核体和异倍体：

首先形成异核体，异核体状态稳定，继那么核融合。娄地青霉和产黄青霉融合可得到三种生长缓慢的原养型菌落，第一种菌落形态正常，在CM上有选择地产生营养缺陷的娄地青霉孢子；第二种菌落是由松散网状菌丝组成的异常形态，在CM上亦产生营养缺陷的娄地青霉孢子。第三种菌落，在MM上形成大的原养型孢子。

而用产黄青霉培养条件的三种菌落都能产生与产黄青霉产生一祥的青霉素，第一和第二种菌落是异核体，第三种菌落是异倍体或局部异倍体。;③形成局部异倍体：

构巢曲霉和烟曲霉融合，种间融合频率比种内至少低5个级数。异核体或完全异倍体状态极短，故别离不到，异核体或二倍体状态可能是致死的。互补细胞内含有亲株一方的完整基因组和另一方的少数染色体，是局部异倍体。在MM上用菌丝或孢子传代可以长期保持。但在CM上的互补细胞迅速别离为构巢曲霉或烟曲霉，但双方同不会同时出现。;至今国内外已成功地进行过诸多真菌的种内、种间、属间的原生质体融合，多为大型食用真菌，如蘑菇、香菇、木耳、凤尾菇、平菇等，取得了相当可观的经济效益。;四微生物细胞工程

研究进展与应用;思考题