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2024-01-26
06外源基因的表达
目录
CONTENTS
引言
外源基因的表达系统
外源基因的表达调控
外源基因的表达优化
外源基因的表达应用
外源基因表达的挑战与前景
01
引言
01
02
04
研究外源基因在宿主细胞中的表达调控机制
利用外源基因表达技术生产重组蛋白或多肽
探究外源基因表达对宿主细胞生理功能的影响
为基因治疗和基因工程提供理论和技术支持
03
定义:将外源基因导入宿主细胞,使其在宿主细胞中表达产生相应的蛋白质或多肽的过程。
意义
实现基因工程的基本目标,生产具有特定功能的蛋白质或多肽;
探究基因表达的调控机制,深入了解生命活动的本质;
为医学、农业、工业等领域提供重要的技术支持和应用价值。例如,利用外源基因表达技术生产疫苗、抗体、酶等生物制品,以及改良作物品种、提高产品质量等。
01
02
03
04
05
02
外源基因的表达系统
优点
01
生长快,操作简便,适用于大量表达;表达产物多聚集于细胞内,便于分离纯化。
缺点
02
缺乏翻译后加工机制,表达产物的生物活性较低;表达产物的稳定性差,易被宿主细胞内的蛋白酶降解;质粒拷贝数不稳定,传代过程中易丢失。
常用原核表达系统
03
大肠杆菌表达系统、枯草芽孢杆菌表达系统等。
具有翻译后加工机制,能表达具有生物活性的蛋白质;表达产物的稳定性好,不易被降解;质粒拷贝数稳定,可长期传代保存。
优点
生长较慢,操作较复杂,成本较高;表达产物多分泌到细胞外,分离纯化相对困难。
缺点
酵母表达系统、昆虫细胞表达系统、哺乳动物细胞表达系统等。
常用真核表达系统
优点
具有极高的感染效率,能将外源基因快速、高效地导入靶细胞;病毒颗粒可作为天然的纳米载体,用于药物的靶向输送。
缺点
存在安全隐患,如病毒逃逸、基因重组等;生产成本高,难以实现大规模应用。
常用病毒表达系统
腺病毒表达系统、慢病毒表达系统、疱疹病毒表达系统等。
03
外源基因的表达调控
启动子调控
通过改变启动子的活性或选择不同强度的启动子,可以调控外源基因的转录水平。
转录因子调控
转录因子可以与启动子或增强子等顺式作用元件结合,从而激活或抑制外源基因的转录。
表观遗传学调控
表观遗传学机制如DNA甲基化、组蛋白修饰等也可以影响外源基因的转录水平。
03
microRNA调控
microRNA可以与mRNA结合并抑制其翻译,从而调控外源基因的表达。
01
5非翻译区调控
5非翻译区可以影响mRNA的稳定性和翻译效率,从而影响外源基因的表达。
02
3非翻译区调控
3非翻译区可以影响mRNA的稳定性和定位,进而影响外源基因的表达。
04
外源基因的表达优化
使用强启动子可以提高外源基因的转录水平。
选择强启动子
调整SD序列与起始密码子的距离和碱基组成,提高翻译效率。
优化SD序列
通过添加融合标签如GST、His等,方便后续蛋白纯化和检测。
添加融合标签
05
外源基因的表达应用
利用外源基因在宿主细胞中表达,生产大量具有生物活性的重组蛋白,如抗体、酶、生长因子等,用于疾病诊断和治疗。
重组蛋白生产
通过基因工程技术,将外源基因导入到微生物、植物或动物细胞中,生产具有药用价值的生物活性物质,如疫苗、干扰素、胰岛素等。
基因工程药物
将外源基因导入到患者体内,修复或替换缺陷基因,达到治疗遗传性疾病和某些获得性疾病的目的。
基因治疗
工业酶制剂生产
利用外源基因在微生物中表达,生产工业用酶制剂,如洗涤剂用酶、纺织用酶、造纸用酶等。
1
2
3
将外源基因导入到农作物中,使其具有抗虫、抗病、抗旱等优良性状,提高作物产量和品质。
转基因作物
利用外源基因在微生物中表达,生产具有杀虫、杀菌作用的生物农药,减少化学农药的使用。
生物农药生产
通过基因工程技术生产具有特定功能的饲料添加剂,如植酸酶、蛋白酶等,提高动物生长速度和饲料利用率。
饲料添加剂
06
外源基因表达的挑战与前景
基因表达的效率和稳定性
外源基因在宿主细胞中的表达效率和稳定性往往受到多种因素的影响,如基因序列、宿主细胞类型、表达载体等。
基因表达的调控
实现外源基因在特定时间和空间的表达调控是基因工程领域的一大挑战。
安全性问题
外源基因的表达可能引发宿主细胞的毒性反应或产生具有潜在危险性的蛋白质。
知识产权和伦理问题
外源基因的表达涉及到知识产权的保护和伦理道德的考量,如基因专利的争议和基因编辑技术的伦理问题等。
加强安全性和伦理监管
在推动外源基因表达技术发展的同时,需要加强对其安全性和伦理问题的监管和评估,确保技术的健康发展和社会利益的最大化。
提高表达效率和稳定性
通过优化基因序列、改进表达载体和宿主细胞等方法,提高外源基因在宿主细胞中的表达效率和稳定性。
实现精准调控
借助基因编辑技术和合成生物学手段,实现外源基
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