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本发明公开了一种用于多片段快速高效组装构建质粒的方法，首先通过引物设计在待组装片段中引入TypeIIS限制性内切酶的酶切位点，并利用设计的引物进行扩增和纯化，然后将得到的待组装片段任意比混合后再TypeIIS限制性内切酶和T4DNA连接酶的作用下进行自组装，得到目的片段；然后通过PCR技术扩增目的片段，最后将目的片段连接至线性化载体上，获得重组质粒，并利用菌落PCR技术和测序进行验证，从而获得正确组装的重组质粒。本发明在组装过程中不依赖于片段摩尔比，同时也不需要将目的片段转入专用载体后再与目标
(19)国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号CN117487830A
(43)申请公布日2024.02.02
(21)申请号202311202918.X
(22)申请日2023.09.18
(71)申请人三峡大
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