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无菌检查方法验证：

取本品，分别加灭菌注射用水1ml溶解，采用薄膜过滤法依法检查(中国药典

2022年版二部附录ⅪH)，应符合规定。

菌液制备：10倍稀释法

菌种培养基菌悬液制备

枯草芽孢杆菌CMCC(B)63501营养琼脂培养基用0.9%无菌氯化钠溶液制成每

1ml含菌少于100cfu(菌落行程单

金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003营养琼脂培养基位)的菌悬液

大肠埃希菌CMCC(B)44102营养琼脂培养基

生孢梭菌CMCC(B)64941硫乙醇酸盐培养基

白色念珠菌CMCC(F)98001改良马丁培养基

黑曲霉菌CMCC(F)98003改良马丁琼脂斜面加入5ml0.9%无菌氯化钠溶液，将

培养基孢子洗脱，再同上制成每ml含菌

小于100cfu的菌悬液

菌悬液制备计数结果

菌种代数稀释级菌落数(cfu/ml)

枯草芽孢杆菌4-61061

金黄色葡萄球菌4-71089

大肠埃希菌4-61078

生孢梭菌4-61067

白色念珠菌4-71083

黑曲霉菌4-41040

1、供试品处理

将供试品去掉铝塑盖，外表面用75%酒精全面消毒，然后向每支样品中注

入1.0ml0.1%的蛋白胨灭菌溶液，备用。

2、检查

阳性对照：将等量的试验菌直接加入到液体硫乙醇酸盐培养基或者改良马丁

液体培养基管中，在相应的温度下培养。液体硫乙醇酸盐培养基管在30-35℃

下培

养；改良马丁液体培养基管在23-28℃下培养3-5天。观察记录。

阴性对照：将灭菌的液体硫乙醇酸盐培养基或者改良马丁液体培养基管直接

放在相应的温度下培养。液体硫乙醇酸盐培养基管在30-35℃下培养；改良马

丁液体培养基管在23-28℃下培养3-5天。观察记录。

样品(薄膜过滤法)：每种实验菌取10支处理好的供试品溶液，将溶液合并

后加入制备好的菌悬液1ml，用0.1%的蛋白胨灭菌溶液稀释至100ml，按薄膜过

滤法过滤，取出滤膜，将其分为3等份，分别置于含硫乙醇酸盐流体培养基及改

良马丁培养基的容器中，其中一份作为阳性对照用。其中：试验菌为金黄色葡萄

球菌、大肠埃希菌、生孢梭菌的滤膜接种至液体硫乙醇酸盐培养基管中；试验菌

为白色念珠菌、黑曲霉菌的滤膜接种至改良马丁液体培养基管中。液体硫乙醇酸

盐培养基管在30-35℃下培养；改良马丁液体培养基管在23-28℃下培养3-5天。

观察记录。

试验结果

菌种