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生物分离-细胞破碎课件
汇报人：AA
2024-01-24
细胞破碎概述
机械法细胞破碎技术
非机械法细胞破碎技术
细胞破碎效果评价
细胞破碎实验操作与注意事项
细胞破碎技术应用实例分析
contents
目
录
01
细胞破碎概述
细胞破碎是指通过物理、化学或生物方法使细胞壁和细胞膜破裂，释放出细胞内含物的过程。
定义
获取细胞内的目标成分，如蛋白质、酶、核酸、多糖等，以便进行后续的分析、纯化或应用。
目的
机械法
物理法
化学法
生物法
01
02
03
04
包括研磨、高压匀浆、超声波破碎等，通过机械力作用使细胞破裂。
包括热激、冷冻、渗透压变化等，通过改变细胞内外环境使细胞破裂。
包括酸碱处理、有机溶剂提取、表面活性剂处理等，通过化学试剂作用使细胞破裂。
包括酶解法、微生物发酵法等，通过生物活性物质作用使细胞破裂。
02
机械法细胞破碎技术
利用研磨介质（如砂砾、玻璃珠等）与细胞壁间的摩擦和剪切力，使细胞壁破裂。
研磨原理
研磨设备
影响因素
研钵、球磨机、砂磨机等。
研磨介质的大小、形状和硬度，研磨速度和时间，料液比等。
03
02
01
通过高速旋转的搅拌器产生强烈的剪切力，使细胞壁破裂。
搅拌原理
高速搅拌器、均质机等。
搅拌设备
搅拌速度和时间，料液比，搅拌器的形状和大小等。
影响因素
利用超声波的空化作用产生的瞬间高压和微射流，使细胞壁破裂。
超声波原理
超声波破碎仪、超声波清洗机等。
超声波设备
超声波的频率和功率，处理时间，料液的性质和浓度等。
影响因素
03
非机械法细胞破碎技术
利用高浓度溶液使细胞内的水分渗出，细胞发生收缩，从而达到破碎细胞的目的。
通过降低细胞外液的渗透压，使细胞吸水膨胀，最终破裂。
低渗溶液法
高渗溶液法
针对细胞壁或细胞膜的特定成分，选择相应的酶进行降解。
酶的选择
控制酶解的温度、pH值和时间等条件，以确保酶解效果。
酶解条件
有机溶剂法
利用有机溶剂（如甲醇、乙醇等）改变细胞膜的通透性，使细胞内容物渗出。
表面活性剂法
使用表面活性剂（如SDS、Tween等）破坏细胞膜结构，达到破碎细胞的目的。
冷冻过程
将细胞置于低温环境下冷冻，使细胞内形成冰晶。
融化过程
将冷冻后的细胞迅速融化，冰晶的形成和融化导致细胞膜破裂。
04
细胞破碎效果评价
粒径分布
描述破碎后细胞碎片的大小分布情况。通过粒径分布可以了解细胞破碎的均匀程度，以及是否存在过大或过小的碎片。
平均粒径
表示破碎后细胞碎片的平均大小。平均粒径越小，说明细胞破碎越细腻，有利于后续分离纯化操作。
VS
表示从破碎细胞中释放出的目标成分的量。通过测定释放量可以了解细胞破碎对目标成分的释放效果。
成分释放曲线
描述随着细胞破碎时间的延长，目标成分释放量的变化情况。通过成分释放曲线可以了解细胞破碎的动力学过程，以及目标成分的释放速率和释放量随时间的变化情况。
目标成分释放量
05
细胞破碎实验操作与注意事项
细胞破碎
01
将准备好的细胞样品加入细胞破碎仪中，按照预实验确定的最佳操作条件进行破碎。注意控制破碎时间和强度，避免过度破碎导致目标物质损失。
破碎效果检测
02
取少量破碎后的细胞悬液进行显微镜观察或流式细胞仪分析，确认细胞破碎效果。
目标物质提取
03
根据目标物质的性质选择合适的提取方法，如有机溶剂萃取、超滤、层析等。注意优化提取条件以提高目标物质的回收率和纯度。
实验人员需佩戴实验服、手套、护目镜等个人防护用品，避免样品飞溅或仪器故障导致的伤害。
个人防护
在操作细胞破碎仪前，确保仪器已正确接地并处于良好工作状态。遵守仪器操作规程，避免违规操作导致的仪器损坏或人员伤亡。
仪器安全
实验结束后，将废弃的细胞样品、试剂等按照实验室废弃物处理规定进行分类和处理，避免对环境造成污染。
废弃物处理
06
细胞破碎技术应用实例分析
通过细胞破碎技术将细胞裂解，释放出细胞内的生物活性物质，如蛋白质、酶、抗体等，用于制备细胞裂解液，为生物医药研究提供重要的原料。
制备细胞裂解液
利用细胞破碎技术破碎细胞后，可通过不同的分离纯化方法提取细胞内的有效成分，如基因工程药物、疫苗、干扰素等，用于疾病的预防和治疗。
提取细胞内有效成分
通过细胞破碎技术获得细胞器、细胞膜等，可用于细胞治疗，如细胞移植、组织工程等，为医学领域提供了新的治疗手段。
细胞治疗
1
2
3
利用细胞破碎技术可制备出具有特定功能的食品添加剂，如酶制剂、增稠剂、乳化剂等，提高食品的品质和加工性能。
制备食品添加剂
通过细胞破碎技术可提取食品中的生物活性物质，如多糖、黄酮类化合物等，用于开发功能性食品或保健品。
提取食品中的生物活性物质
在酿造工业中，利用细胞破碎技术可促进原料的发酵过程，提高产品的产量和质量。
酿造工业中的应用
利用细胞破碎技术处理工业废水中的有机
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