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实验:叶绿体中色素的提取和分离
班级姓名座号教师评价
一、实验目的
初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法;探索叶绿体中有几种色素。
实验原理
(1)提取:绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂①__________中。
(2)分离:各种色素在层析液中的②__________不同,③__________高的随层析液在滤纸上扩散得快;反之则慢。
因而色素就会随着④__________在⑤__________上的扩散而分离开。
实验步骤
实验过程
思考
提
取
色
素
取材:称取5g绿叶
研磨:剪碎叶片,加少许SiO2、CaCO3,再加入10mL无水乙醇,迅速充分的研磨
过滤:漏斗基部放一块尼龙布,将研磨液迅速倒入玻璃漏斗
收集:用试管收集色素滤液,及时用棉塞将试管口塞严
1.加入SiO2的作用是
CaCO3的作用是
2.为什么要用棉塞将试管口塞严?
分
离
色
素
制滤纸条
剪滤纸条:将滤纸条的一端剪去两角
铅笔画线:距剪角一端1cm处用铅笔画线画一条细的横线
若滤纸条的一端不剪去两角,则实验结果如何?
滤液划线
用毛细吸管吸少量滤液
画线:沿铅笔线划一条细线(注意:划线要“细、直、齐”)
待干燥后,重复划2-3次
划滤液细线时,为什么要“细、直、齐”?
纸上层析
向烧杯中倒入3ml层析液
(以层析液不没及滤液细线为准)
将滤纸条尖端朝下略微斜靠烧杯内壁,
轻轻插入层析液中,用培养皿盖盖上烧杯
(注意:层析液不能没及滤液线)
为什么不能让滤液细线触及层析液?为什么要用培养皿盖盖上烧杯?
实验结果
在滤纸条上画出色素带,并在每条色素带旁边标明颜色(注意每条色素带的宽窄比例)
五、讨论
滤纸条上有几条不同颜色的色带?其排序怎样?宽窄如何?这说明了什么?
注意:
材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶片。如菠菜叶、棉花叶、洋槐叶等。
画滤液细线时,应以细、直、颜色浓绿为标准,重复画线时必须等上次画线干燥衙再进行,重复2-3次。
层析时不要让滤液细线触及层析液。
注意事项
因丙酮和层析液都是易挥发且有一定毒性的有机溶剂,所以研磨要快,收集的滤液要用棉塞塞住,层析时要加盖,尽量减少有机溶剂的挥发。
二氧化硅,目的是为了研磨充分,有利于色素的提取;加少许碳酸钙的目的是为了防止研磨过程中,叶绿体中的色素受到破坏。
分离色素时,一定不要让滤纸条上的滤液细线接触到层析液,这是因为色素易溶解在层析液中,导致色素带不清晰,影响实验效果。
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