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《生物组织中还原糖与蛋白质的鉴定》学案

陈臻

一、可溶性还原糖的鉴定原理：

生物组织中普遍存在的可溶性糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的分子内都含有游离的具有还原性的半缩醛基，因此叫还原性糖；蔗糖的分子内没有游离的半缩醛基，因此叫非还原性糖，不具有还原性。实际上本实验中，用斐林试剂只能检验生物组织中可溶性的还原糖存在与否，而不能鉴定可溶性的非还原性糖。

可溶性还原糖与斐林试剂（质量浓度为0.1g/ml的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/ml的硫酸铜溶液配制而成）混合后,可以生成砖红色沉淀。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色到棕色再到砖红色

二、蛋白质的鉴定原理：

鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂。双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1g/ml的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.01g/ml的硫酸铜溶液。在碱性溶液NaOH中，双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）能与Cu2+作用，形成紫色或紫色的络合物，这个反应叫双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应，从而用来鉴定蛋白质的存在。

题例领悟

例1：用斐林试剂鉴定可溶还原糖时，溶液的颜色变化过程为：

A、浅蓝色

棕色

砖红色

B、无色

浅蓝色

棕色

C、砖红色

浅蓝色

棕色

D、棕色

绿色

无色

2解析：斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后，立即生成浅蓝色的Cu（OH）

2

沉淀。

2Cu（OH）与加入的葡萄糖在加热的条件下，能够生成砖红色的Cu2O沉淀。因

2

此，答案为A

例2：将面团包在纱布中在清水中搓洗，鉴定黏留在纱布上的黏稠物质和洗出的白浆用的试剂分别是：

A、碘液、苏丹Ⅲ溶液 B、双缩脲试剂、碘液C、双缩脲试剂、苏丹Ⅳ染液 D、碘液、斐林试剂

解析：白浆为淀粉，淀粉遇碘变蓝，黏稠物质为蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应。因此，答案为B

自我评价

一、选择题：

1、徒手切片时的刀口方向应是 （ ）

A、向前 B、向内 C、向左 D、向右

2、在鉴定蛋白质样品时，加双缩脲试剂的正确操作方法是 （ ）

A、先加A液，混合后再加B液 B、先加B液，混合后再加A液

C、A、B液混合后立即加入 D、上述方法都可以采用

3、在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，对实验材料的选择叙述中，错误的是 （ ）

A、甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等，都含有较多的糖且近于白色，因此可以用于进行可溶性还原糖的鉴定

B、花生种子含脂肪多且肥厚，是用于脂肪鉴定的理想材料

C、大豆种子蛋白质含量高，是进行蛋白质鉴定的理想的植物组织材料D、鸡蛋清蛋白质多，是进行蛋白质鉴定的动物材料

4、下列关于实验一操作步骤的叙述中，正确的是 （ ）

A、用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定B、脂肪的鉴定实验中需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴

C、鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液

D、用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后，再加入含样品的试管中，且必须现混现用

5、某学生在显微镜下观察落花生子叶的切片，当转动细准焦螺旋时，有一部分细胞较清晰，另一部分较模糊，这是由于 （）

A、反光镜末调好 B、标本切得厚薄不均C、细准焦螺旋末调好D、显微镜物镜损坏

6、在可溶性还原糖及蛋白质鉴定时，事先留出一些组织样液的目的是（ ）

A、与反应后混合液的颜色做对比B、失败后再重做一次C、下次实验再用 D、组织样液过多颜色反应不明显