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鸡血清和兔肝的AChE纯化、固定化及其性质研究的中期报告

中期报告

一、实验目的：

1.纯化鸡血清和兔肝的AChE酶

2.固定化已纯化的AChE酶

3.研究纯化后及固定化的AChE酶的性质

二、实验方法：

1.纯化AChE酶

首先，取鸡血清和兔肝组织分别制备异丙醇沉淀物，将沉淀物在pH7.3条件下再经纤维素柱层析进行分离纯化。收集纯化后酶的组分，用同一酶活力的单位数测定其蛋白质含量。

2.固定化AChE酶

固定化酶主要采用凝胶包埋法，将纯化后的AChE酶加入聚乙二醇温和凝胶中，然后用塑料膜包裹保护凝胶，最后切块备用。

3.研究AChE酶的性质

采用酶学方法研究纯化和固定化AChE酶的酶学性质，包括pH值、温度、抑制剂和自凝等方面的实验。

三、实验进展：

1.纯化AChE酶

通过异丙醇提纯法和纤维素柱层析法，已经初步获得了鸡血清和兔肝的AChE酶纯化物，经过洗脱、测定酶活及蛋白质含量、组装等步骤，目前得到了纯化后的酶。

2.固定化AChE酶

目前采用凝胶包埋法固定化纯化后的酶，成功将AChE酶固定在聚乙二醇凝胶中，并经过塑料膜保护后切成小块快速冷冻保存。

3.研究AChE酶的性质

目前正在进行AChE酶的性质研究，主要是测定酶的pH值，温度，抑制剂和自凝等方面的实验，最终将得到较为详细的酶学性质结果。