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第十五章 分枝杆菌属

教学要求

掌握结核分枝杆菌的生物学性状、免疫特点、结核菌素试验和卡介苗预防。

熟悉结核分枝杆菌的致病和免疫机制、微生物学检查法、抗酸染色的原理、步骤及结果。

了解分枝杆菌属的通性和种类、非结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌的特性及致病性。

教学要点

[学习引导]1.简述结核分枝杆菌形态染色,生长,抵抗力特点及与脂质之间的关系。

何谓抗酸染色?BCG 来源及应用

简述结核菌素试验的原理,结果,解释和用处。

简述结核分枝杆菌的免疫特点,BCG 来源及应用。

分枝杆菌属是一类细长略弯曲的杆菌,因繁殖时有分枝生长的趋势而得名,一般不易着色,但加温或延长染色时间着色后能抵抗盐酸乙醇的脱色,故又称抗酸杆菌,致病菌主要有结核分枝杆菌,引起结核病;麻风分枝杆菌,引起麻风病;还有其他非典型分枝杆菌经常感染艾滋病人,是免疫抑制病人的机会致病菌。

一、结核分枝杆菌(M.Tuberculos)is

(一)生物学特性

形态染色结核分枝杆菌细长且直,不同种可呈现丝状、球状、串珠状等多形性。抗酸染色法是以5%石碳酸复红加温染色后再经3%盐酸乙醇脱色,再以美蓝复染,结核分枝杆菌能抵抗酸酒精脱色,被染成红色,为抗酸染色阳性。

培养培养特点为专性需氧、营养要求高、生长缓慢,常用罗氏固体培养基,在固体培养基上培养2~4周后,形成菜花样R型菌落,液体培养基上呈表面生长,形成菌膜

抵抗力因细胞壁中含大量脂质,故抵抗力较强且与一般细菌不同,对干燥、酸碱和碱性染料抵抗力强(三强);而对乙醇、湿热及紫外线抵抗力较弱,抗结核药异烟肼、链霉素、利福平等有效(四不强)。

变异性结核分枝杆菌的形态、菌落、毒力及耐药性等均可发生变异

耐药性变异:结核分枝杆菌对抗结核药物较易产生耐药性,造成耐药菌株增多,给治疗造成困难

毒力变异:将有毒的牛分枝杆菌培养于含甘油、胆汁、马铃薯的培养基中,经230

次移种传代,历时13年而获得了减毒活菌株,即卡介苗,目前广泛用于人类结核病的预防

(二)致病性1.致病物质及其致病机制

脂质:成份复杂,与毒力有关的成分有:1)索状因子:破坏细胞线粒体膜、影响细胞呼吸、抑制白细胞游走和引起慢性肉芽肿。

磷脂:使炎症灶中的巨噬细胞转变为类上皮细胞,从而形成结核结节。

硫酸脑苷脂:抗吞噬作用。

蜡质D:可激发机体产生迟发型超敏反应。

蛋白质:有抗原性,和蜡质D结合后能使机体发生超敏反应,

多糖:细胞壁表面的多糖物质类似荚膜,能够抵抗吞噬细胞的吞噬作用。2.所致疾病

传播途径及所致疾病:结核分枝杆菌可经呼吸道、消化道、破损的皮肤粘膜等多

种途径进入机体,侵犯多种组织器官,引起相应的结核病,但易通过吸入含菌的飞沫微粒或尘埃进入肺泡,故结核病以肺部感染最多见

疾病类型

肺部感染:可分原发感染和原发后感染两大类,

原发感染:初次感染而在肺内发生的病变,多发生于儿童,主要特点为人体缺乏对结核分枝杆菌的特异性免疫力,病灶局部反应轻微,但原发灶内的结核分枝杆菌易扩散。原发灶、淋巴管炎和肿大的肺门淋巴结合称为原发综合征。

原发后感染:多为原发感染的再活化,也可由外源性再感染引起,发生于成年人,病灶以肺部为多见,主要特点为机体已有了对结核分枝杆菌的特异性免疫力,因此,病灶多局限,一般不累及邻近淋巴结。呈慢性组织损害,易发生结核结节、干酪样坏死和纤维化。当病灶中大量结核分枝杆菌释放至痰中,称为开放性肺结核。部分患者结核分枝杆菌可进入血液循环引起肺内播散,形成血行播散型肺结核

肺外感染:当结核分枝杆菌进入血液循环引起肺外播散时,可致肺外结核病,如脑、肾、骨、关节、肠、生殖系统等结核。

(三)免疫性

特点 以细胞免疫为主,属有菌免疫(感染免疫);感染、免疫与超敏反应同时存在

OT试验

原理:应用结核菌素(目前采用结核杆菌制成的纯蛋白衍化物)进行皮肤试验来测定机体对结核分枝杆菌是否能引起超敏反应的一种试验,以判断机体对结核分枝杆菌有无免疫力。

方法:取纯蛋白衍化物5单位分别注射于两前臂皮内,48~72小时后观察结果。

结果判断:红肿硬结小于5mm者为阴性,超过5mm者为阳性,超过15mm为强阳性,阴性为无免疫力;阳性为有免疫力。

应用:可用于①选择卡介苗接种对象及接种效果测定;②作为婴幼儿结核病诊断的参考;③借用其测定肿瘤患者细胞免疫功能;④在未接种过BCG的人群中作结核杆菌感染的流行病学调查。

(四)微生物学检查:

形态学检查 标本直接涂片或集菌后涂片,进行Ziehl-Neelsen抗酸染色。若找到抗酸

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