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四.问答题：
1.血液标本采集方法有哪些？各有什么利弊？操作时应注意些什么？
2.何谓抗凝剂？常用抗凝剂有哪些？
3.EDTA、枸橼酸钠草酸钠肝素的原理及主要用途？**
4.pH对细胞染色有哪些影响？**
5.为什么瑞氏染色血片上可以**看到不同的色彩？构成这些色彩的物质是什么？
6.HiCN测定原理及注意事项？**
原理：在HiCN转化液中，红细胞被溶血剂破坏，各种血红蛋白（SHb除外）中Fe2+被高铁氰化钾氧
化成Fe3+,形成高铁血红蛋白（Hi），Hi与氰化钾提供的氰根离子（CN_）结合生成稳定复合物HiCN。棕红
色的HiCN在波长540nm处有吸收峰，用分光光度计测定该处的吸光度，在换算成每升血中血红蛋白浓度，
或用HiCN参考液进行比色测定制作标准曲线提供查阅。
注意事项：1、分光光度计波长从500~600nm分几个波段测定其吸光度，如所测最大吸光度在540nm,
表示分光计波长准确；峰谷504nm;HiCN试剂作空白，波长710nm~800nm处，比色杯直径1.000cm时，吸
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光度应小于0.002；以参考液血红蛋白含量为横坐标、吸光度为纵坐标，绘制曲线。尽量的点落在曲线上，
直线最低点为显示灵敏度；HiCN转化液保存在棕色瓶内，不能保存在塑料瓶里；不能在0℃以下保存；
白细胞过多引起浑浊，可离心取上清液比色；比色测定后废液集于广口瓶；转化液配制要按剧毒品管理程
序操作。
7.SDS测定原理及注意事项？
原理：十二烷基硫酸钠为一种阴离子表面活性剂，具有轻度氧化作用；血液中SHb以外所有血红蛋白
均可与低浓度的SDS作用亚铁血红素被氧化成稳定的棕红色高铁血红素样复合物（SDS-Hb）。由于SDS-Hb
的毫摩尔消光系数尚未确认，故不能根据标本吸光度直接计算结果；需用HiCN法及本法分别测定多份不同
浓度抗凝血或溶血的血红蛋白浓度和吸光度，以此绘制标准曲线，间接计算血红蛋白浓度。
注意事项：SDS液可以破坏白细胞，因此对血液分析仪不宜使用。
8.红细胞生理性，病理性增多的原因常见有哪些？
9.红细胞病理性减少的主要原因？举例说明。
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10.血红蛋白测定大致分为哪几类？ICSH推荐哪种方法？为什么要推荐此法？
测定方法测定原理
全血铁法Hb分子组成
比重法、折射仪法血液物理特性
血气分析法Hb与O可逆性结合的特性
比色法Hb衍生物光谱特性
11.红细胞压积测定的方法有哪些？方法学评价如何？HCT有何临床意义？**
临床意义：1）与RBC相似；2）可作真红、输血及输液疗效观察指标；3）可用作计算MCV和MCHC；
4）血液流变学指标之一，增加表明血黏度增高。
12.什么叫网织红细胞？测定方法有哪些？其方法学评价如何？有何临床意义**
网织红细胞是有核红细胞刚刚失去核的阶段，介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡阶段细胞，浆内
尚残留有嗜碱性RNA，经碱性染料活体染色后，在包体内可见蓝色点状或网状结构，略大于成熟红细胞。
方法评价
普通显微镜法简便、成本低，可直观细胞形态；但影响因素多，重复性查
玻片法水分易蒸发，染色时间短，结果偏低
试管法易掌握，重复性较好，易复查
Miller窥盘计数法规范计算区域，减少了实验误差，ICSH推荐，其CV值可减少到10%
血液分析仪法检测细胞多，精密度高，与手工法相关性好，易于标准化；仪器贵；再出现豪焦小
体、有核红细胞、巨大血小板时结果常出现假性增高
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