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聚合酶链反应（PCR）检验实验室

检查要点指南（2016版）

聚合酶链反应检验实验室是指通过基因扩增的方式检测特定的DNA或

RNA的检验实验室。聚合酶链反应（PolymeraseChainReaction，PCR）

是一种在体外特异性扩增靶DNA序列的技术，其基本过程为模板双链DNA

的变性、引物与模板DNA的退火和在DNA聚合酶引导下的链延伸反应三个

阶段的多次循环。每一次循环后的扩增产物均可作为下一轮循环的模板，

理论上，扩增产物量呈指数形式上升，即经过n个循环后，产物量增加到

n

2倍。PCR试剂操作简单，短时间内在体外可获得数百万个特异靶DNA序

列的复制，为临床疾病的诊断、治疗监测和预后评估提供了一种极有帮助

的实验室辅助手段。

PCR检验实验室是PCR试剂生产企业在产品检验过程中不可缺少的工

作环境，其环境控制水平和质量管理水平直接影响着最终产品是否合格，

能否放行。由于该产品本身的特殊性，《医疗器械生产质量管理规范附录

体外诊断试剂》、《医疗器械生产质量管理规范体外诊断试剂现场检查指导

原则》条款中，明确对PCR试剂的生产和检验环境做出规定。此外现行卫

生行业的法规、标准以及相关文献中对于PCR检验实验室均作出规定，主

要涉及《全国临床检验规程》（第三版）、《医疗机构临床基因扩增管理办

法》（卫办医政发〔2010〕194号）、《医疗机构临床基因扩增检验实验室工

作导则》及《临床诊断中聚合酶链反应（PCR）技术的应用》（WS/T230-2002）

等行业标准的相关要求。

本检查指南旨在帮助北京市医疗器械监管人员增强对PCR检验相关过

程的认知和把握，指导全市医疗器械监管人员对PCR检验实验室设计建设

与质量控制的监督检查工作。同时，为PCR试剂生产企业在PCR检验实验

室的设计建造和管理要求提供参考。

当国家相关法规、标准、检查要求发生变化时，应当重新讨论以确保

本检查指南持续符合要求。

一、适用范围

本检查指南可作为北京市食品药品监督管理局组织、实施的体外诊断

试剂产品注册质量管理体系现场核查、《医疗器械生产许可证》现场核查、

医疗器械生产监督检查等各项涉及PCR检验实验室检查的参考资料。

基因测序检验实验室等涉及PCR试剂的相关部分应当参照本检查指南

执行。

二、检查要点

（一）现场查看生产企业PCR检验实验室布局

生产企业应当提供PCR检验实验室设计方案和/或平面设计图（应当

标明风向或压差梯度）。

检验实验室与PCR试剂生产区域应当在各自独立的建筑物或空间内，

保证空气不直接联通，防止扩增时形成的气溶胶造成交叉污染。

2.原则上PCR检验实验室应当设置以下区域：试剂储存和准备区、标

本制备区、扩增区、扩增产物分析区。根据使用仪器的功能，区域可适当

合并。若使用实时荧光定量PCR仪且不需要进行后续产物分析工作，扩增

区、扩增产物分析区可合并。若使用样本处理、核酸提取及扩增检测为一

体的自动化分析仪，则标本制备区、扩增区、扩增产物分析区可合并。

3.各区域在物理空间上应当完全相互独立，各区域无论是在空间上还

是在使用中，应当始终处于完全的分隔状态。不应当只是形式上的分区，

不应当是一个区域嵌套一个区域。

4.各区域不应当有空气的直接相通。扩增区与扩增产物分析区各区域

宜采用独立直排方式出风。采用空调机组方式的，PCR检验实验室应当具

备独立空调机组；同时应当考虑停机后各房间空气连通的可能性，采取必

要的控制措施。

5.按照试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区

方向空气压力应当以递减的方式进行，使得PCR检验实验室的空气流向应

当按照试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区方向

进行，防止扩增产物顺空气气流进入扩增前的区域。空气流向应当为单向，

禁止下游污染上游。应当设置合理的压差梯度，并安装压差监测装置，以

有效证明空气流向，压差梯度不宜低于5帕。

6.设置缓冲间的，缓冲间内通向内实验室和走廊的门应当安装连锁装

置或采取相应措施，避免出现两个门同时打开的情况。

7.各区间若设置传递窗，应当为双侧开门，要求密封严实，并且两侧

的门应当为互锁装置或采取相应措施保证两侧门不会同时开启。

（二）现场查看仪器