黑木耳核糖体失活蛋白基因的克隆的任务书.docxVIP

黑木耳核糖体失活蛋白基因的克隆的任务书

任务名称：黑木耳核糖体失活蛋白基因的克隆

任务描述：

黑木耳是一种常见的食用菌，其具有良好的营养价值和药用价值。本任务旨在克隆黑木耳的核糖体失活蛋白基因，对其功能进行研究，为黑木耳的遗传改良以及生产利用提供理论基础。

任务要求：

1.设计引物对黑木耳中的目标基因进行PCR克隆；

2.提取黑木耳总RNA并反转录合成cDNA；

3.进行RT-PCR验证克隆的目标基因；

4.构建目标基因的原核表达载体，进行大量表达并纯化目标蛋白；

5.对目标蛋白进行生物学性质鉴定，分析其功能和表达特点。

预期阶段时间节点：

1.引物设计与PCR克隆：1周；

2.RNA提取及cDNA合成：2天；

3.RT-PCR验证克隆：1周；

4.目标基因的原核表达载体构建：1周；

5.目标蛋白的大量表达、纯化和功能鉴定：3周。

工作计划：

1.第1周：了解实验流程，设计引物并进行PCR反应，克隆目标基因；

2.第2周：提取黑木耳总RNA并进行反转录合成cDNA，进行RT-PCR验证克隆的目标基因；

3.第3周：构建目标基因的原核表达载体，并进行质粒测序；

4.第4周～第6周：进行大量表达并纯化目标蛋白；

5.第7周～第9周：对目标蛋白进行生物学性质鉴定，分析其功能和表达特点。

相关参考文献：

1.Chen,C.,Beaudry,R.M.(2003).TheantibacterialactivityofLentinulaedodesdiskandstalkextracts.Mycologia,95(5),967-973.

2.Liang,C.,Mao,L.,Luo,X.,Zhou,X.(2016).EffectsofthermalprocessingonantioxidantandimmunomodulatoryactivitiesofpolysaccharidesfromLentinusedodes.JournaloftheScienceofFoodandAgriculture,96(10),3426-3431.

3.Okuno,T.,Sato,T.(2001).CatalogueofgenesfoundamongcDNAsfromLentinulaedodesfruitingbody.Mushroombiologyandmushroomproducts,8,25-69.