石蜡包埋的制作过程.pdfVIP

石蜡包埋

1．取材：根据不同的实验目的，选择相应的材料，材料要求新鲜，避免挤压，挫伤，

干枯。

（1）肉眼观察大体，记录大体标本的病变性状（形状，大小，重量，色泽，质地，表

面，切面形态，和周围组织的关系等），同时注明采集时间，地点，名称，组织部位，并编

号。

（2）取同时具有病变组织和正常组织的部位，所取组织块要大小适当，要能说明问

题，又要考虑固定剂的渗透能力。一般取厚2mm－5mm，大小15mm×15mm左右。

如果所需要的组织块过大，可以分几个块固定。对于大体标本，取材时以应保存完整性，

可对大体标本做楔形切片。

（3）注意事项：a.标本避免挤压，防止其形态改变。小标本可用镊子夹取，大标本取

时应使用锋利的刀。b.取材要平整，小标本最少要有一个面是平整的，并做出标记。c.去

除多余的组织。d.标本应及时，新鲜，防止细胞自溶。

2．固定：

(1)及时将所取组织块放入合适的固定液中,常用的有甲醛。固定的用在于通过固定

液，在尽量短的时间内使原生物体停止生命活动，保持如同生前一样精细的细胞结构，防

止死后自溶；尽可能避免使组织膨胀或收缩，并且软硬合适易于切片；增加细胞内含物的

折光性，易于镜下观察，同时增加媒染用和染色能力。固定的方法有浸泡法，熏蒸法，

灌注法等。

(2)注意事项：a.针对标本，选择合适的固定液。b.固定液的量一般为所固定组织的

20倍；如固定的组织较多，可用纱布使瓶底不平整，固定液易于渗入。c.注意固定时的

温度，固定时间要充分。

3．脱水：是用一种能与水又能与透明液混合的液体来逐渐置换样品中游离的水。最

常用的是酒精，它能使组织块收缩，变硬，应注意时间不易过长。

（1）脱水过程一般是酒精浓度70％（时间不限）－80％（时间不限）－95％（1小

时左右）－95％（1小时左右）－100％（1小时左右）－100％（1小时左右）。

（2）注意事项：a.脱水剂既能与水相溶，又能与媒浸剂相溶。b.脱水剂的浓度应足够

高。c.应逐步而不应跨越太大的进行，否则将引起组织强烈的收缩或变形，在经无水乙醇

处理时，应保证试剂的纯度。

4．媒浸（透明）：是用一种能与酒精又能与包埋介质混合的液体来置换样品中的酒

精，从而为最终的包埋创造一个有利的条。

（1）常用的透明剂一般是二甲苯，甲苯，冬青油等。二甲苯透明能力强，时间过长可

使组织收缩，变脆，一般浸泡0.5－2小时。冬青油透明能力较弱，不会使组织变脆，透明

时间可不限。

（2）注意事项：如果组织经透明后为灰白色，不透明，则表示脱水不彻底，应再次进

行脱水。

5．浸蜡：将完成透明步骤的组织块浸入透明剂与石蜡混合液中，不断提高石蜡的比例，

直至用石蜡完全置换了组织块中的透明剂，便于今后的包理与切片。注意事项：石蜡有液

态与固态二种，浸蜡要在恒定温箱（60°c）中进行，以保证石蜡处于液态中。但是温度不

易过高，会导致组织收缩，变硬变脆，难以切出理想切片。

6．包埋：用同种硬度的石蜡包埋组织，形成蜡块以利于以后的切片。将液态石蜡倒入

器皿中，用镊子将浸好蜡的组织块夹入器皿中，浅埋在石蜡中，展平，再倒入石蜡将组织

块包埋。待石蜡冷却成固态包埋完毕。