几种常用植物性食物原料成分对大肠杆菌的抑菌作用.pptVIP

几种常用植物性食物原料成分对大肠杆菌的抑菌作用目录一、实验目的二、实验设备及材料三、理论依据四、实验方法步骤五、实验注意事项六、实验讨论七、结论一、实验目的1.研究几种含有抑菌成分的植物性食物，对大肠杆菌的抑菌作用。2.了解平板菌落计数法和抑菌圈法两种实验方法。1.研究几种含有抑菌成分的植物性食物，对大肠杆菌的抑菌作用。2.了解平板菌落计数法和抑菌圈法两种实验方法。二、实验设备及材料设备：研钵、烧杯、培养皿、试管、吸管、漏斗、滤纸、分析天平等材料：大蒜瓣、生姜、青辣椒、菌种：大肠杆菌培养基：牛肉膏蛋白胨培养基三、理论依据已知大蒜、生姜、辣椒中含有各种有效的抑菌成分，对它们采用研磨的方法制成的提取液也将有抑菌作用。本实验将研究其制剂对大肠杆菌的抑菌作用，并进行比较。四、实验方法与步骤1.原材料提取液的制备称取大蒜瓣，生姜，青辣椒各70g，分别放入研钵中捣碎研磨，研磨后分别加入10mL自来水稀释，充分混合后，过滤，制成提取液备用。2.牛肉膏蛋白胨培养基的制备牛肉膏蛋白胨培养基配方：牛肉膏1g、蛋白胨2g、氯化钠1g、琼脂4g、蒸馏水200mLPH：7.2～7.4灭菌条件：121℃,20min按配方分别称取各药品，放入烧杯中加热融化，再移至锥形瓶中，加棉塞，包装，待灭菌3.玻璃器皿的包装，培养基和玻璃器皿的高压灭菌①移液管（4个）、培养皿（8个），分别用报纸将其包装②灭菌想灭菌器中加入清洁软水→堆放物品→盖上盖子（对称地紧固螺栓）→打开电源设置灭菌温度121℃，灭菌时间20min→加热，排放冷空气（打开排气阀）→待有白烟冒出关掉排气阀→结束，关电源。待指针归“零”后，打开排气阀，取出物品4.试验菌悬液的制备：用接种环挑取大肠杆菌至无菌水中，制成菌悬液5.抑菌试验①平板菌落计数法分别吸取菌悬液1mL和一种原材料提取液1mL于培养皿中，混合后倒入冷却至45℃左右的牛肉膏蛋白胨培养基，摇匀冷却后倒置与37℃培养箱内培养24h，取出后进行菌落计数。并制两个用1mL无菌水代替原材料提取液的平板，作空白对照。每种提取液做两个平行试验。根据平板菌落数计算抑菌率。【抑菌率＝（空白试验的菌落数－加样试验的菌落数）／空白试验的菌落数】②抑菌圈法吸取0.2mL菌液至培养基平板上，涂匀。用记号笔将平板分成三个区域并做标记，分别用无菌镊子夹取灭菌滤纸圈沾取提取液放置平板上的相应区域，培养24h后，观察各抑菌圈的直径。五、实验注意事项1.原材料应研磨充分，使材料中的有效抑菌成分能被充分提取出来。2.对不同的原材料应作相同处理，使数据具有可比性。3.每种原材料都应做平行试验，取平均值。4.整个实验都应在无菌条件下进行，以减少空气中的杂菌进入培养基。5.高压灭菌的注意事项①向灭菌器加水时，水位不应超过水位线，以免水进入灭菌桶内，浸湿被灭菌物品②堆放物品时应留有空隙③盖盖子时，应对称的紧固螺栓，注意不易宁得太紧，以以免损坏橡胶密封垫圈④灭菌结束后一定要待指针归零后，再打开排气阀，取出物品六、实验结果平板菌落数实验组大蒜瓣提取液平板生姜提取液平板青辣椒提取液平板对照平板实验组116424160896实验组220392176832平均值18408168864抑菌率97.92%52.78%80.56%抑菌圈大小比较：大蒜瓣辣椒生姜七、实验讨论（一）大蒜、生姜和辣椒制剂对大肠杆菌的抑制作用机理分析大蒜是一种天然的植物抗生素。大蒜中的大蒜素对多种致病菌，如大肠杆菌、葡萄球菌、伤寒杆菌、霍乱杆菌、白喉杆菌等有明显的抑菌作用。这主要是由于大蒜素分子中的活性基团硫醚基(Is_o—s一)与细菌生长繁殖所必需的半脱氨酸分子中的巯基相结合，从而抑制了细菌的生长繁殖。而且大蒜性味辛温，既可以做调味剂，又可以防治疾病，应用于食品添加剂，可以起到良好的抑菌防腐作用。生姜中的姜黄素、姜酮都有一定的杀菌作用，而且姜黄素是一种很强的抗氧化剂，能对大肠杆菌产生抑菌效果。辣椒中的辣椒素和辣椒油，都是一些抗氧化物质，其中的主要有效成分芳香烃基香辣油有一定的抗菌作用，能够对大肠杆菌起到一定的抑菌作用。（二）用直接研磨的方法对原材料提取所得制剂的抑菌作用分析直接研磨法提取天然植物原料，其有效成分未受任何损失，抑菌效果表现良好。（三）应用分析通过试验表明，这几种常用植物性食物原材料成分对大肠杆菌都有抑菌作用，将其以适当的方式作为食品添加剂用于食品加工和保藏有实际可行的开发前景。七、结论大蒜、生姜、洋葱、青辣椒、红辣椒对大肠杆菌都有抑菌作用。大蒜对大