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重组人ADAM15去整合素结构域蛋白的制备及其作用机理的中期报告

研究背景：

整合素是细胞外基质与细胞内的细胞骨架连接的重要蛋白质。ADAM15为整合素分子上的切割酶，能够对整合素分子进行剪切和释放，从而影响细胞区隔、增殖、生长、分化等多种生物学过程。近年来，研究发现ADAM15在多种肿瘤中高表达，并且与肿瘤的侵袭、转移等密切相关。因此，研究ADAM15与整合素相互作用的机理对于深入了解肿瘤的发生和发展具有重要意义。

研究目的：

本研究旨在制备重组人ADAM15去整合素结构域蛋白，并探讨其与整合素的相互作用机理，为深入开展肿瘤发生和发展的研究提供理论基础和实验支持。

研究方法：

通过基因重组技术，设计并克隆ADAM15去整合素结构域蛋白的表达载体，并将其转化到大肠杆菌中进行表达。利用IonExchangeChromatography和GelFiltrationChromatography技术将重组蛋白进行纯化，并利用WesternBlotting技术进行蛋白质的鉴定。利用线性扫描速率和表面等温滴定等技术，研究ADAM15去整合素结构域蛋白与整合素的相互作用机理。

研究结果：

利用基因重组技术成功构建了表达ADAM15去整合素结构域蛋白的载体，并得到了高效的表达。通过IonExchangeChromatography和GelFiltrationChromatography技术获得了高纯度的重组蛋白。WesternBlotting实验表明，重组蛋白的分子量为约45kDa，具有良好的免疫原性。通过线性扫描速率和表面等温滴定等技术，发现ADAM15去整合素结构域蛋白与整合素之间存在特异性的结合作用，并且其结合能力与pH和离子浓度有关。

研究结论：

通过本研究得到的重组人ADAM15去整合素结构域蛋白，在离体条件下与整合素存在特异性的结合作用，这为深入探究ADAM15与整合素相互作用的机理，以及肿瘤的发生和发展提供了实验基础。此外，本研究的实验结果也为开发ADAM15与整合素相互作用的抑制剂提供了潜在的靶点。