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第41练基因工程及生物技术的安全性和伦理问题;1[2021湖北·16,2分,难度★★☆☆☆]某实验利用PCR技术获取目的基因,实验结果显示除目的基因条带(引物与模板完全配对)外,还有2条非特异条带(引物和模板不完全配对)。为了减少反应中非特异条带的产生,以下措施中有效的是 ()A.增加模板DNA的量B.延长热变性的时间C.延长延伸的时间D.提高复性的温度
;【解析】PCR过程中,引物和模板不完全配对会形成非特异条带,增加模板DNA的量不会减少反应中非特异条带的产生,A项错误;延长热变性的时间,有利于双链DNA解聚为单链,不能减少反应中非特异条带的产生,B项错误;延长延伸的时间,有利于合成新的DNA链,但不能减少反应中非特异条带的产生,C项错误;在一定温度范围内,选择较高的复性温度可减少引物和模板间的非特异性结合,D项正确。;2[2023广东·11,2分,难度★★☆☆☆]“DNA粗提取与鉴定”实验的基本过程是:裂解→分离→沉淀→鉴定。下列叙述错误的是 ()A.裂解:使细胞破裂释放出DNA等物质B.分离:可去除混合物中的多糖、蛋白质等C.沉淀:可反复多次以提高DNA的纯度D.鉴定:加入二苯胺试剂后即呈现蓝色
;【解析】DNA粗提取与鉴定实验的基本过程是:裂解→分离→沉淀→鉴定。裂解的目的是使细胞破裂,释放出DNA等物质,A正确。DNA不溶于酒精,但某些蛋白质溶于酒精,利用这一原理,可以初步分离DNA与蛋白质等,DNA分离过程中混合物中的多糖、蛋白质等可被去除,B正确。DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质,可反复多次以提高DNA的纯度,C正确。进行DNA鉴定时可以使用二苯胺试剂,但要进行沸水浴加热后才能观察到颜色变化,D错误。;3[2021辽宁·14,2分,难度★★★☆☆]腈水合酶(N0)广泛应用于环境保护和医药原料生产等领域,但不耐高温。利用蛋白质工程技术在N0的α和β亚基之间加入一段连接肽,可获得热稳定的融合型腈水合酶(N1)。下列有关叙述错误的是 ()A.N1与N0氨基酸序列的差异是影响其热稳定性的原因之一B.加入连接肽需要通过改造基因实现C.获得N1的过程需要进行转录和翻译D.检测N1的活性时先将N1与底物充分混合,再置于高温环境
;【解析】据题意可知,利用蛋白质工程技术在N0的α和β亚基之间加入一段连接肽,可获得热稳定的融合型腈水合酶(N1),故N1与N0氨基酸序列的差异是影响其热稳定性的原因之一,A正确;改造蛋白质的结构需要通过改造基因来实现,B正确;利用蛋白质工程技术获得N1的过程涉及转录和翻译,C正确;检测N1的活性时,应先将N1置于高温环境中,再将其与底物充分混合,D错误。;4[2022辽宁·12,2分,难度★★★☆☆]科技发展抗虫和耐除草剂玉米双抗12-5是我国自主研发的转基因品种。为给监管转基因生物安全提供依据,采用PCR方法进行目的基因监测,反应程序如图所示。下列叙述正确的是()
A.预变性过程可促进模板
DNA边解旋边复制B.后延伸过程可使目的基
因的扩增更加充分C.延伸过程无需引物参与
即可完成半保留复制D.转基因品种经检测含有目的基因后即可上市
;【解析】预变性的温度为94℃,在这个温度下,双链DNA解旋为单链,但模板链不易和引物结合,不能进行复制,A错误。延伸的目的是合成新的子链,后延伸延长了延伸时间,使目的基因的扩增更加充分,B正确。延伸过程需要引物与模板链结合,在引物的3端加上相应的核苷酸,C错误。转基因品种经检测含有目的基因且已经表达使生物体表现出相应性状后,还需要经过一系列的安全性评价,符合相应标准后才能上市,D错误。;5[2023湖北·4,2分,难度★★★☆☆]用氨苄青霉素抗性基因(AmpR)、四环素抗性基因(TetR)作为标记基因构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒,构建基因表达载体(重组质粒),并转化到受体菌中。下列叙述错误的是()A.若用HindⅢ酶切,目的基因转录的产物可能不同B.若用PνuⅠ酶切,在含Tet(四环素)培养基中的菌落,
不一定含有目的基因C.若用SphⅠ酶切,可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重
组质粒构建成功与否D.若用SphⅠ酶切,携带目的基因的受体菌在含Amp(氨苄青霉素)和Tet的培养基中能形成菌落
;【解析】若用HindⅢ酶切质粒和含有目的基因的DNA片段,用DNA连接酶将两者连接成重组质粒,目的基因和质粒有正向连接和反向连接两种连接形式,因此,目的基因转录的产物可能不同,A正确;若用PvuⅠ酶切,会破坏氨苄青霉素抗性基因,在含Tet(四环素)培养基中的菌落可能是含有目的基因的重组质粒,也可能是质粒自身连接的普通质粒,因此,在含Tet(四环素)
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