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编号
xxxxx有限公司起草人日期
食品中霉菌和酵母菌测定的标准操作规审核人日期
批准人日期
程实施日期
第版文件密级
1目的
规范食品中霉菌和酵母菌测定的标准操作规程。
2范围
本标准规定了食品中霉菌和酵母菌（mouldsandyeasts）的计数方法。
本标准适用于各类食品中霉菌和酵母菌的计数。
3责任
质量部组织制订、化验室负责实施。
4内容
设备和材料
除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：
冰箱：2℃～5℃。
恒温培养箱：28℃±1℃。
均质器。
恒温振荡器。
显微镜：10×～100×。
电子天平：感量g。
无菌锥形瓶:容量500mL、250mL。
无菌广口瓶：500mL。
无菌吸管：1mL(具mL刻度)、10mL(具mL刻度)。
无菌平皿：直径90mm。
无菌试管:10mm×75mm。
无菌牛皮纸袋、塑料袋。
培养基和试剂
马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基：见附录A中。
孟加拉红培养基：见附录A中。
检验程序
霉菌和酵母计数的检验程序见图1。
图1霉菌和酵母计数的检验程序
操作步骤
样品的稀释
固体和半固体样品：称取25g样品至盛有225mL灭菌蒸馏水的锥形瓶中，充
分振摇，即为1:10稀释液。或放入盛有225mL无菌蒸馏水的均质袋中，用拍击
式均质器拍打2min，制成1:10的样品匀液。
液体样品：以无菌吸管吸取25mL样品至盛有225mL无菌蒸馏水的锥形瓶（可
在瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1:10的样品匀液。
取1mL1:10稀释液注入含有9mL无菌水的试管中,另换一支1mL无菌吸管
反复吹吸,此液为1:100稀释液。
按操作程序，制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1次1mL无
菌吸管。
根据对样品污染状况的估计，选择2个～3个适宜稀释度的样品匀液（液体样
品可包括原液），在进行10倍递增稀释的同时，每个稀释度分别吸取1mL样品
匀液于2个无菌平皿内。同时分别取1mL样品稀释液加入2个无菌平皿作空白对
照。
及时将15mL～20mL冷却至46℃的马铃薯-葡萄糖-琼脂或孟加拉红培养基(可
放置于46℃±1℃恒温水浴箱中保温)倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。
培养
待琼脂凝固后，将平板倒置，28℃±1℃培养5d，观察并记录。
菌落计数
肉眼观察，必要时可用放大镜，记录各稀释倍数和相应的霉菌和酵母数。以菌落
形成单位（colonyformingunit，CFU）表示。
选取菌落数在10CFU～150CFU的平板，根据菌落形态分别计数霉菌和酵母数。
霉菌蔓延生长覆盖整个平板的可记录为多不可计。菌落数应采用两个平板的平均
数。
结果与报告
计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数计算。
若所有平板上菌落数均大于150CFU，则对稀释度最高的平板进行计数，其他平
板可记录为多不可计，结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。
若所有平板上菌落数均小10CFU，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释
倍数计算。
若所有稀释度平板均无菌落生长，则以小1乘以最低稀释倍数计算；如为原
液，则以小1计数。
报告
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