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- 2024-03-25 发布于四川
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一、实验室常见菌株简介
Xl1-Blue菌株
基因型:endA1gyrA96(nalR)thi-1recA1relA1lacglnV44F‘[Tn10proAB+lacIq
Δ(lacZ)M15]hsdR17(rK-mK+)。
特点:具有卡那抗性、四环素抗性和氯霉素抗性。
用途:分子克隆和质粒提取。
BL21(DE3)菌株
基因型:F–ompTgaldcmlonhsdSB(rB-mB-)λ(DE3[lacIlacUV5-T7gene1ind1
sam7nin5])。
特点:该菌株用于以T7RNA聚合酶为表达系统的高效外源基因的蛋白表达宿主。
T7噬菌体RNA聚合酶基因的表达受控于λ噬菌体DE3区的lacUV5启动子,该
区整合于BL21的染色体上。该菌适合于非毒性蛋白的表达。
用途:蛋白质表达。
BL21(DE3)ply菌株
基因型:F-ompTgaldcmlonhsdSB(rB-mB-)λ(DE3)pLysS(cmR)。
特点:该菌株带有pLysS,具有氯霉素抗性。此质粒还有表达T7溶菌酶的基因,
T7溶菌酶能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰IPTG诱导的表达。适
合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表达。
用途:蛋白质表达
DH5α菌株
基因型:F-endA1glnV44thi-1recA1relA1gyrA96deoRnupGΦ80dlacZΔM15
Δ(lacZYA-argF)U169,hsdR17(rK-,λ–
特点:一种常用于质粒克隆的菌株。其Φ80dlacZΔM15基因的表达产物与pUC
载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补,可用于蓝白斑筛选。recA1和endA1
的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。
用途:分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。
JM109菌株
基因型:endA1glnV44thi-1relA1gyrA96recA1mcrB+Δ(lac-proAB)e14-
[F‘traD36proAB+lacIqlacZΔM15]hsdR17(rK-mK+)。
特点:部分抗性缺陷,适合重复基因表达,可用于M13克隆序列测定和蓝白斑
筛选。
用途:分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。
DH10B菌株
基因型:
F-mcrAΔ(mrr-hsdRMS-mcrBC)Φ80dlacZΔM15ΔlacX74endA1recA1deoR
Δ(ara,leu)7697araD139galUgalKnupGrpsLλ-
ThemostwidelyusedE.colistrainforBACcloningisDH10B。
hostforpUCandotherα-complementationvectors;pBR322
usefulforgeneratinggenomiclibrariescontainingmethylatedcytosineoradenine
residues,usefulforplasmidrescueprocedures。
ELECTROMAXDH10BT1CELLS
说明:
DH10B细胞是高转化效率的E.coli,可以完美应用于大多数实验应用。
DH10B基因型具有以下特点:
lacZΔM15用于重组克隆的蓝/白斑筛选
消除了mcrA、mcrBC、mrr和hsdRMS限制系统,允许构建更多具有代表性的
基因组文库(1,2)
endA1突变,可以增加质粒产量和数量
高效率转化大小为150kb的质粒,用于产生cDNA或基因组文库
DH10B?可以表达tonA的基因型,tonA能够提供对T1和T5噬菌体感染的抗性
(DH10B?T1R)。
DH10B的基因型:F·mcrAΔ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80lacZΔM15ΔlacX74recA1
endA1araD139Δ(ara,leu)7697galUgalKλ·rpsL(StrR)nupG
DH10BT1R的基因型:F·mcrAΔ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80lacZΔM15ΔlacX74
recA1endA1araD139Δ(ara,leu)7697galUgalKλ·rpsL(StrR)
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