实验室常用菌株及特性.pdfVIP

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  • 2024-03-25 发布于四川
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一、实验室常见菌株简介

Xl1-Blue菌株

基因型:endA1gyrA96(nalR)thi-1recA1relA1lacglnV44F‘[Tn10proAB+lacIq

Δ(lacZ)M15]hsdR17(rK-mK+)。

特点:具有卡那抗性、四环素抗性和氯霉素抗性。

用途:分子克隆和质粒提取。

BL21(DE3)菌株

基因型:F–ompTgaldcmlonhsdSB(rB-mB-)λ(DE3[lacIlacUV5-T7gene1ind1

sam7nin5])。

特点:该菌株用于以T7RNA聚合酶为表达系统的高效外源基因的蛋白表达宿主。

T7噬菌体RNA聚合酶基因的表达受控于λ噬菌体DE3区的lacUV5启动子,该

区整合于BL21的染色体上。该菌适合于非毒性蛋白的表达。

用途:蛋白质表达。

BL21(DE3)ply菌株

基因型:F-ompTgaldcmlonhsdSB(rB-mB-)λ(DE3)pLysS(cmR)。

特点:该菌株带有pLysS,具有氯霉素抗性。此质粒还有表达T7溶菌酶的基因,

T7溶菌酶能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰IPTG诱导的表达。适

合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表达。

用途:蛋白质表达

DH5α菌株

基因型:F-endA1glnV44thi-1recA1relA1gyrA96deoRnupGΦ80dlacZΔM15

Δ(lacZYA-argF)U169,hsdR17(rK-,λ–

特点:一种常用于质粒克隆的菌株。其Φ80dlacZΔM15基因的表达产物与pUC

载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补,可用于蓝白斑筛选。recA1和endA1

的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。

用途:分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。

JM109菌株

基因型:endA1glnV44thi-1relA1gyrA96recA1mcrB+Δ(lac-proAB)e14-

[F‘traD36proAB+lacIqlacZΔM15]hsdR17(rK-mK+)。

特点:部分抗性缺陷,适合重复基因表达,可用于M13克隆序列测定和蓝白斑

筛选。

用途:分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。

DH10B菌株

基因型:

F-mcrAΔ(mrr-hsdRMS-mcrBC)Φ80dlacZΔM15ΔlacX74endA1recA1deoR

Δ(ara,leu)7697araD139galUgalKnupGrpsLλ-

ThemostwidelyusedE.colistrainforBACcloningisDH10B。

hostforpUCandotherα-complementationvectors;pBR322

usefulforgeneratinggenomiclibrariescontainingmethylatedcytosineoradenine

residues,usefulforplasmidrescueprocedures。

ELECTROMAXDH10BT1CELLS

说明:

DH10B细胞是高转化效率的E.coli,可以完美应用于大多数实验应用。

DH10B基因型具有以下特点:

lacZΔM15用于重组克隆的蓝/白斑筛选

消除了mcrA、mcrBC、mrr和hsdRMS限制系统,允许构建更多具有代表性的

基因组文库(1,2)

endA1突变,可以增加质粒产量和数量

高效率转化大小为150kb的质粒,用于产生cDNA或基因组文库

DH10B?可以表达tonA的基因型,tonA能够提供对T1和T5噬菌体感染的抗性

(DH10B?T1R)。

DH10B的基因型:F·mcrAΔ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80lacZΔM15ΔlacX74recA1

endA1araD139Δ(ara,leu)7697galUgalKλ·rpsL(StrR)nupG

DH10BT1R的基因型:F·mcrAΔ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80lacZΔM15ΔlacX74

recA1endA1araD139Δ(ara,leu)7697galUgalKλ·rpsL(StrR)

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