仪器分析：第十五章 色谱分析法导论.pptxVIP

第十五章色谱分析法导论§15-1概述§15-2色谱分离原理§15-3色谱法基本理论§15-4分离度§15-5气相色谱定性分析§15-6气相色谱定量分析§15-1概述一、色谱法利用样品在两相间的分配来分离、分析多组分混合物的技术。1906年俄国植物学家茨维特固定相流动相在色谱发展史上占有重要地位的英国人A.J.P.Martin(马丁)和R.L.M.Synge(辛格)，他们提出色谱塔板理论；发明液-液分配色谱；预言了气体可作为流动相（即气相色谱）。1952年，因为他们对分配色谱理论的贡献获诺贝尔化学奖气相色谱仪二、色谱法的分类1.按两相所处的状态分类气相色谱液相色谱按流动相的状态分类气相色谱适用于气体和低沸点有机化合物的分析，仪器简单，操作方便，应用广泛。可在不同操作温度条件下使用。气固色谱气液色谱按固定相不同又分为液固色谱液液色谱液相色谱液相色谱适用于高沸点、不易气化的、热不稳定及生物活性物质的分析，通常在室温条件下工作。2.按固定相所处的外形分类填充柱色谱毛细管柱色谱；柱色谱薄层色谱和纸色谱平板色谱3.按组分在两相间的分离机理分类吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、空间排阻色谱、离子色谱薄层色谱和纸色谱三、色谱法的特点1.分离效率高复杂混合物、性质相近的有机同系物及旋光异构体等2.灵敏度高可以检测出ppt(10-9)级甚至ppb(10-12)3.分析速度快4.应用范围广可分析有机或无机的气、液、固体试样缺点：组分的定性较为困难解决方法：发展联用技术§15-2色谱分离原理一、分离原理1.气固色谱:固定相是多孔性的固体吸附剂颗粒，其分离是基于固体吸附剂对试样中各组分的吸附能力的不同；2.气液色谱:固定相由担体和固定液所组成，固定液涂敷在担体表面，其分离混合物是基于固定液对试样中各组分的溶解能力的不同。二、分配系数和分配比1.分配系数K在一定温度和压力下，组分在两相间分配达到平衡时的浓度比，称为分配系数。一定温度和压力下，K越大，出峰越慢试样中的各组分K值不同是分离的基础2.分配比k(容量因子）在一定温度和压力下，组分在两相间分配达到平衡时，分配在固定相和流动相中的总量之比。式中VM为色谱柱中流动相体积；VS为色谱柱中固定相体积;β称为相比三、气相色谱流出曲线1.基线色谱柱中仅有流动相通过检测器时，所检测到的信号。2.峰高从色谱峰顶点到基线之间的垂直距离。3.区域宽度1）标准偏差δ，0.607峰高处峰宽的一半，EF/22）半峰宽（Y1/2）色谱峰高一半处的宽度(GH).2.354δ3）峰底宽（Y）色谱峰两侧拐点上的切线在基线上截距之间的距离(IJ)。4δ气相色谱流出曲线4.保留值1）用时间表示的保留值保留时间(tR)：组分从进样到柱后出现浓度极大值时所需的时间。死时间(tM)：tM=L/u不与固定相作用的组分（气体）的保留时间。调整保留时间(tR)：tR=tR－tM2）用体积表示的保留值VR=tR×F0保留体积(VR)：组分从进样到柱后出现浓度极大值时所通过的流动相体积F0：流动相体积流速VM=tM×F0死体积(VM)：色谱柱内未被固定相占据的空隙体积调整保留体积(VR)：VR=VR－VM3）相对保留值r21又称选择性因子，只与柱温和固定相性质有关，表示了固定相对这两种组分的选择性5.保留值与分配系数K的关系tR=tM(1+k)VR=VM(1+k)6.保留值与分配比k的关系色谱峰反映的信息：1）根据峰的个数，判断样品中所含最少的组分数2）根据保留值对色谱峰进行定性分析3）根据峰高或面积进行定量分析4）色谱峰的保留值及其区域宽度是评价色谱柱分离效能的依据．5）色谱峰两峰间的距离，是评价固定相(和流动相)选择是否合适的依据．§15-3色谱法基本理论一、塔板理论1941JamesMartin理论假设：1）色谱柱由一块一块的虚拟塔板组成，在一个塔板内组分在气液两相间可以很快达到平衡；2）塔板内一部分空间由固定相占据，另一部分由流动相占据，称为板体积；3）载气进入色谱柱不是连续而是脉动的，每次进气为一个板体积；4）试样沿色谱柱方向的扩散可以忽略不计；5）分配系数在各塔板上是常数。塔板号1234色谱柱长L，虚拟的塔板高度H，色谱柱的理论塔板数为n，则三者的关系为：n＝L/H单位柱长的塔板数越多，表明柱效越高有效塔板数有效塔板高度注意：同一色谱柱用不同物质计算可得到不同的塔板数和塔板高度。n=n有效(1+1/k)2塔板理论的讨论:1.柱长一定，有效塔板数