食品中粗脂肪的测定我的.pptVIP

样品处理前的注意事项1.固体样品要粉碎，颗粒大小要合适，注意粉碎过程中的温度，防止脂肪氧化。2.样品要干燥温度低——酶活力高，脂肪易降解。温度高——脂肪易氧化成结合态。较理想的方法是冷冻干燥法。第63页,共74页，2024年2月25日，星期天测定用样品、抽提器、抽提用有机溶剂都需要进行脱水处理第一，抽提体系中有水，会使样品中的水溶性物质溶出，导致测定结果偏高;第二，抽提体系中有水，则抽提溶剂易被水饱和(尤其是乙醚，可饱和约2%的水)，从而影响抽提效率;第三，样品中有水，抽提溶剂不易渗入细胞组织内部，结果不易将脂肪抽提干净。第64页,共74页，2024年2月25日，星期天试验试样中脂肪是否抽提完全1、滤纸痕迹法可用被回流的乙醚滴在滤纸上乙醚挥干后有无油迹来判断，无油迹证明脂肪已被抽提完全。2、镜检法用洁净千燥的玻璃棒将抽提营内的乙醚滴在载波片上，待乙醚挥干后把载玻片烤干，置于显微镜下观察液滴四周有无油迹。如无油迹存在，说明样品中的脂肪已经抽提完全第65页,共74页，2024年2月25日，星期天脂肪提取时应注意提取时水浴温度不可过高，以每分钟从冷凝管滴下80滴左右，每小时回流6-12次为宜，提取过程应注意防火。在抽提时，冷凝管上端最好连接一个氯化钙干燥管，这样，可防止空气中水分进入，也可避免乙醚挥发在空气中，如无此装置可塞一团干燥的脱脂棉球。第66页,共74页，2024年2月25日，星期天注意事项1.样品应干燥后研细，样品含水分会影响溶剂提取效果，而且溶剂会吸收样品中的水分造成非脂成分溶出。装样品的滤纸筒一定要严密，不能往外漏样品，但也不要包得太紧影响溶剂渗透。滤纸筒高度不要超过通气管高度,否则冷凝效果不行;滤纸筒中样品高度不要超过回流弯管(虹吸管)高度，否则超过弯管的样品中的脂肪不能提尽，造成误差。第67页,共74页，2024年2月25日，星期天2.对含多量糖及糊精的样品，要先以冷水使糖及糊精溶解，经过滤除去，将残渣连同滤纸一起烘干，再一起放入抽提管中。3.抽提用的乙醚或石油醚要求无水、无醇、无过氧化物，挥发残渣含量低。因水和醇可导致水溶性物质溶解，如水溶性盐类、糖类等，使得测定结果偏高。过氧化物会导致脂肪氧化，在烘干时也有引起爆炸的危险。第68页,共74页，2024年2月25日，星期天4.提取时水浴温度不可过高，以每分钟从冷凝管滴下80滴左右，每小时回流6-12次为宜，提取过程应注意防火。5.在抽提时，冷凝管上端最好连接一个氯化钙干燥管，这样，可防止空气中水分进入，也可避免乙醚挥发在空气中，如无此装置可塞一团干燥的脱脂棉球。第69页,共74页，2024年2月25日，星期天6.抽提是否完全，可凭经验，也可用滤纸或毛玻璃检查，由抽提管下口滴下的乙醚滴在滤纸或毛玻璃上，挥发后不留下油迹表明已抽提完全。7.试样抽提完毕后需将接收瓶中乙醚在水浴上完全蒸发挥净后再放人烘箱中，若乙醚未挥净将接收瓶放人烘箱会有爆炸的危险。第70页,共74页，2024年2月25日，星期天8.乙醚完全挥净后，将接收瓶放人烘箱中(10℃土5℃)烘干至恒重。烘干后易吸湿，因此称量要迅速。反复干燥还会因脂类氧化而增重，一般再次复烘时，烘30而n后冷却称重，不易增重。过高的温度和过长的时间容易使不饱和脂肪酸氧化增重或低级游离脂肪酸挥发失重。第71页,共74页，2024年2月25日，星期天9.整个实验在使用乙醚时应注意室内通风换气，实验周围不要有明火，以防空气中有机溶剂蒸气着火或爆炸。而且乙醚是麻醉剂，吸多了可是人昏迷10如果实验室里没有乙醚或无水乙醚时，可以用石油醚提取，石油醚沸点选择30℃一60℃。第72页,共74页，2024年2月25日，星期天第73页,共74页，2024年2月25日，星期天感谢大家观看第74页,共74页，2024年2月25日，星期天(3)取出试管，加入10mL乙醇，混合。冷却后将混合物移于100mL具塞量筒中，以25mL乙醚分次洗试管，一并倒入量筒中。待乙醚全部倒入量筒后，加塞振摇1min，小心开塞，放出气体，再塞好，静置12min，小心开塞，并用石油醚—乙醚等量混合液冲洗塞及筒口附着的脂肪。静置10~20min，待上部液体清晰，吸出上清液于已恒重的锥形瓶内，再加5mL乙醚于具塞量筒内，振摇，静置后，仍将上层乙醚吸出，放入原锥形瓶内。将锥形瓶置水浴上蒸干，置100±5℃干燥箱中干燥2h，取出放干燥器内冷却0.5h后称量，重复以上操作直至恒重。第31页,共74页，2024