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《包装饮用水中铜绿假单胞菌的快速检测方法》.pdf

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ICS67.160.20

CCSX51

团体标准

T/CBIA0XX—20XX

包装饮用水中铜绿假单胞菌的

快速检测方法

(征求意见稿)

202X-XX-XX发布202X-XX-XX实施

中国饮料工业协会发布实施

T/CBIA0XX—202X

包装饮用水中铜绿假单胞菌的快速检测方法

1范围

本标准规定了包装饮用水中铜绿假单胞菌的快速定性检测方法。

本标准适用于包装饮用水铜绿假单胞菌的检验。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引

用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修

改单)适用于本文件。

GB4789.1食品安全国家标准食品微生物学检验总则

GB8537-2018食品安全国家标准饮用天然矿泉水

GB8538食品安全国家标准饮用天然矿泉水检验方法

GB19298-2014食品安全国家标准包装饮用水

3原理

铜绿假单胞菌是专性需氧微生物,液体培养基组合振荡培养的方式可以为铜绿假单胞菌提供

充分的营养条件和氧气环境,通过测量培养液浊度可以客观、便捷地识别微生物的生长状态。萘

啶酮酸等抗生素具有一定选择性,可抑制铜绿假单胞菌外的革兰氏阴性菌生长。对培养液划线分

离纯化菌落后,通过绿脓菌素试验、产氨试验等技术,可以对疑似菌进行鉴定。

GB19298-2014、GB8537-2018对铜绿假单胞菌的限量要求是0CFU/250mL,本方法采

用250mL等量定性检测,未检出/250mL的检测结果可等同于0CFU/250mL检测结果下作出

的风险评估结论。

4定义

CN本底浊度值CNbackgroundNTU

多次试验阴性对照样浊度的平均值。

因萘啶酮酸不易溶于水,故含有萘啶酮酸的CN液体培养基呈现微浑浊状态。在培养过程中,

具有孔状结构的滤膜会改变CN液体培养基的浊度,故将阴性对照的浊度定义为CN本底浊度。

5实验室要求

应符合GB4789.1中2实验室基本要求的规定。

6设备和材料

1

T/CBIA0XX—202X

除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其它设备和材料要求如下:

6.1膜过滤系统。

6.2无菌滤杯。

6.3无菌平头无齿镊子。

6.4无菌滤膜:微孔薄膜,直径47mm或50mm,孔径0.45μm。

6.5无菌锥形瓶及配套透气瓶塞:容积100mL。

6.6恒温振荡培养箱:温度36℃±1℃,转速150rpm。

6.7浊度计及配套比色管:测量范围宜0~200NTU。

6.8紫外灯检测器:波长360nm±20nm。

7培养基和试剂

7.1CN液体培养基:见A.1。

7.2无菌水:经121℃灭菌15min的纯水。

7.3CN琼脂:见A.2。

8检验程序

检验程序见图1。

水样过滤:将250mL水样过滤至滤膜

转膜:将滤膜转移至CN液体培养基中

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