连接酶及其他二.pptVIP

?逆转录酶四、用途逆转录酶在基因工程中可用于cDNA的合成。即可将任何真核基因的mRNA经反转录形成cDNA拷贝,然后构建克隆,大量扩增,并表达这种基因,从而为真核基因的研究与其核遗传工程提供了一项必不可少的手段。75第32页,共47页，2024年2月25日，星期天一、性质末端转移酶催化脱氧核苷酸添加到DNA分子的3′-OH末端。这很像DNA聚合酶通过5′3′聚合5′-脱氧核苷三磷酸合成一条DNA链。所不同的是末端转移酶不需要模板。第四节末端转移酶76第33页,共47页，2024年2月25日，星期天二、用途主要用途是给载体和外源DNA分别加上互补的同聚物尾巴，以便二者在体外连接。进行DNA3′-OH末端标记。标记物可以是放射性的，如α-32P-dNTP,也可以是非放射性的,如生物素-11-dUTP（生物素和亲和素）,它们可用于DNA序列分析、DNaseⅠ足迹分析、分子杂交等实验中。77第34页,共47页，2024年2月25日，星期天二、用途进行同聚物接尾用末端转移酶给一群DNA分子3′-OH末端接上oligo（dA）或（dG）,给另一群DNA分子3′-OH末端接上oligo（dT）或（dC）,混合这两群分子,就能使末端转移酶接上的同聚物尾部退火形成环状分子。这种方法称为同聚物接尾法。78第35页,共47页