SDSPAGE分离胶浓缩胶配方.docx

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成分配制不同体积SDS

成分

配制不同体积SDS分离胶所需各成分的体积(毫升)

1) 根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS的分离胶(即下层胶):

SDS

SDS分离胶浓度

6%胶

8%胶

10%胶

12%胶

15%胶

最佳分离范围

50-150kD

30-90kD

20-80kD

12-60kD

10-40kD

6%胶

5

10

15

20

30

50

蒸馏水

2.0

4.0

6.0

8.0

12.0

20.0

30%Acr-Bis(29:1

)

1.0

2.0

3.0

4.0

6.0

10.0

1MTris,pH8.8

1.9

3.8

5.7

7.6

11.4

19.0

成分配制不同体积SDS

成分

配制不同体积SDS分离胶所需各成分的体积(毫升)

成分

配制不同体积SDS分离胶所需各成分的体积(毫升)

成分

配制不同体积SDS分离胶所需各成分的体积(毫升)

成分

配制不同体积SDS分离胶所需各成分的体积(毫升)

10%SDS

0.05

0.1

0.15

0.2

0.3

0.5

10%过硫酸铵

0.05

0.1

0.15

0.2

0.3

0.5

TEMED

0.004

0.008

0.012

0.016

0.024

0.04

8%胶

5

10

15

20

30

50

蒸馏水

1.7

3.3

5.0

6.7

10.0

16.7

30%Acr-Bis(29:1

1.3

2.7

4.0

5.3

8.0

13.3

)

1MTris,pH8.8

1.9

3.8

5.7

7.6

11.4

19.0

10%SDS

0.05

0.1

0.15

0.2

0.3

0.5

10%过硫酸铵

0.05

0.1

0.15

0.2

0.3

0.5

TEMED

0.003

0.006

0.009

0.012

0.018

0.03

10%胶

5

10

15

20

30

50

蒸馏水

1.3

2.7

4.0

5.3

8.0

13.3

30%Acr-Bis(29:1

1.7

3.3

5.0

6.7

10.0

16.7

)

1MTris,pH8.8

1.9

3.8

5.7

7.6

11.4

19.0

10%SDS

0.05

0.1

0.15

0.2

0.3

0.5

10%过硫酸铵

0.05

0.1

0.15

0.2

0.3

0.5

TEMED

0.002

0.004

0.006

0.008

0.012

0.02

12%胶

5

10

15

20

30

50

蒸馏水

1.0

2.0

3.0

4.0

6.0

10.0

30%Acr-Bis(29:1

2.0

4.0

6.0

8.0

12.0

20.0

)

1MTris,pH8.8

1.9

3.8

5.7

7.6

11.4

19.0

10%SDS

0.05

0.1

0.15

0.2

0.3

0.5

10%过硫酸铵

0.05

0.1

0.15

0.2

0.3

0.5

TEMED

0.002

0.004

0.006

0.008

0.012

0.02

15%胶

5

10

15

20

30

50

蒸馏水

0.5

1.0

1.5

2.0

3.0

5.0

30%Acr-Bis(29:1

2.5

5.0

7.5

10.0

15.0

25.0

)

1MTris,pH8.8

1.9

3.8

5.7

7.6

11.4

19.0

10%SDS

0.05

0.1

0.15

0.2

0.3

0.5

10%过硫酸铵

0.05

0.1

0.15

0.2

0.3

0.5

TEMED

0.002

0.004

0.006

0.008

0.012

0.02

注:如果配制非变性胶,参考上述配方,不

注:如果配制非变性胶,参考上述配方,不加10%SDS 即可配制成非变性PAGE 胶。

成分配制不同体积SDS 浓缩胶所需各成分的体积(毫升)1) 按照如下表格配制SDS 的

成分

配制不同体积SDS 浓缩胶所需各成分的体积(毫升)

5%胶

2

3

4

6

8

10

蒸馏水

1.4

2.1

2.7

4.1

5.5

6.8

30%Acr-Bis(29:1

)

0.33

0.5

0.67

1.0

1.3

1.7

1MTris,pH8.8

0.25

0.38

0.5

0.75

1.0

1.25

10%SDS

0.02

0.03

0.04

0.06

0.08

0.1

10%过硫酸铵

0.02

0.03

0.04

0.06

0.08

0.1

TEMED

0.002

0.003

0.004

0.006

0.008

0.01

TBST 缓冲液

每2L体积中含:

1M

TrisHCL(pH7.5)

100mL

Nacl

16g

KCL

吐温

0.4g

1ml

1) 抗体去除液

每50mL抗体去除液中含

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