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  • 2024-04-03 发布于中国
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简述常见色谱分离法的类型及基本原理.pdf

简述常见色谱分离法的类型及基本原理

色谱分离法是一类对物质进行分析和分离的重要手段,广泛应用

于化学、生物化学、药品、环境等领域。常见的色谱分离法主要包括

气相色谱(GasChromatography,GC)、液相色谱(Liquid

Chromatography,LC)、超高效液相色谱法(Ultra-High

PerformanceLiquidChromatography,UHPLC)、毛细管电泳

(CapillaryElectrophoresis,CE)等。本文将分别对这些色谱分离

法的类型和基本原理进行介绍。

一、气相色谱(GC)

气相色谱是利用气相作为移动相进行分离的色谱分离法,适用于

描写分析样品中挥发性和半挥发性有机化合物的组成和含量,对非极

性化合物富有选择性。其基本原理是将待分离的混合物通过一定方法

进样,然后通过携带气体流动的固定相柱进行分离,使用检测器进行

检测,最后形成色谱图。GC分析主要有两种模式,即气定常模式和温

度编程模式。

气定常模式:在气定常模式下,固定相的温度是恒定不变的。样

品经进样器进入柱状固定相,随着固定相温度的递增,各组分在柱中

停留时间渐次增长,从而实现了分离。

温度编程模式:在温度编程模式下,固定相的温度是随时间递增

的。通过渐增柱温,可以改变各组分在柱中的停留时间,以实现对样

品中组分的分离。该方法因为能够提高分离效率,主要应用于复杂混

合物的分析。

二、液相色谱(LC)

液相色谱是液体相与固定相之间相互作用的色谱分离法,其基本

原理是待分析的混合物通过一种液相载体进行分离,静止相可以是固

体(固定相液相色谱,SPLC)或是液体(液-液色谱,LLC)。LLC又可

分为正相液相色谱(NormalPhaseLiquidChromatography,NPLC)

和反相液相色谱(ReversePhaseLiquidChromatography,RPLC)。

正相液相色谱:正相液相色谱是以极性固定相为静止相的液相色

谱,常用的固定相有硅胶和氨基硅胶。它适用于极性化合物的分离,

如酸类、醇类、酮类、醚类等。

反相液相色谱:反相液相色谱是以非极性固定相为静止相的液相

色谱,常用的固定相有疏水性的碳链固定相、脂肪酸碳碳链固定相等。

反相液相色谱广泛用于生物、药物和环境等领域的分离,在生物化学

中的重要地位得到了广泛认可。

超高效液相色谱法:超高效液相色谱法是在液相色谱的基础上发

展起来的一种分离技术,其特点主要在于流动相的压力较高,流动相

流速快,并且使用超高效柱。超高效液相色谱法具有分离效率高、时

间短、分析速度快和样品消耗少等优点,广泛应用于生物制药、食品

安全、环境污染等领域。

毛细管电泳:毛细管电泳是一种利用毛细管作为固定相、电压作

为驱动力,通过在电场中输运带电化合物分离的分析技术。根据毛细

管内静电场的不同,毛细管电泳可分为几种类型,如毛细管凝胶电泳、

毛细管电泳色谱和电泳电化学检测等。

毛细管电泳在分析化学、生物医药和环境监测等领域广泛应用,

其优点包括分离效率高、分析速度快、用样量少、消耗低等。此外,

毛细管电泳还可以与质谱联用,形成毛细管电泳-质谱联用技术,进一

步提高了分析的灵敏性和选择性。

综上所述,气相色谱、液相色谱、超高效液相色谱和毛细管电泳

是常见的色谱分离法。每种方法都有其适用的样品类型、分析速度和

分离效果等特点,因此在具体的分析实验中,需要选择合适的色谱分

离法进行分析。

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