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《生物产品的分析与检验技术》项目六氨基酸的分析与检验任务二谷氨酸的测定主讲教师：左莹生物技术及应用专业教学资源库

■谷氨酸是一种酸性氨基酸。分子内含两个羧基，化学名称为α-氨基戊二酸，俗名又叫麸酸。■有鲜味，微溶于水，而溶于盐酸溶液，等电点为3.22。■L-谷氨酸的用途广泛，它本身作为药品，能治疗肝昏迷症，也可用来生产味精、食品添加剂、香料和用于生物化学的研究。■检测方法主要有旋光法、滴定法、比色法和色谱法等。

任务二谷氨酸的测定二、中和滴定法测定谷氨酸含量1.原理谷氨酸具有2个酸性的--COOH基和一个碱性的—NH2基，因此可以用碱液滴定其中—COOH基，以消耗碱的量间接求得谷氨酸含量。

2.试剂与仪器1.试剂■试剂：氢氧化钠标准溶液0.1mol／L氢氧化钠标准溶液0.05mol／L，将0.1mol／L氢氧化标准溶液准确稀释1倍。■仪器：自动电位滴定仪二、中和滴定法测定谷氨酸含量

3.操作步骤（1）校正自动电位滴定仪。（2）样品粉碎后称取0.25ｇ，精确至0.0001ｇ，置于100mL烧杯中，加水70mL，加热使其全部溶解。（3）冷却至室温，采用电位滴定法，以0.05mol／Ｌ标准氢氧化钠溶液滴定，终点pH值控制在7.0，记录消耗氢氧化钠溶液的体积（V）。同时做空白试验，记录消耗氢氧化钠溶液的体积。（V）二、中和滴定法测定谷氨酸含量

4.结果计算谷氨酸含量按下式计算：X——样品中谷氨酸含量，％V——试液消耗氢氧化钠标准溶液的体积，mLV0——空白消耗氢氧化钠标准溶液的体积，mLC——氢氧化钠标准溶液的浓度mol／mL0.1471——1.00mL氢氧化钠标准溶液相当于L一谷氨酸(C5H9N04)的质量，g；m——样品质量，g二、中和滴定法测定谷氨酸含量

5.结果记录测定次数测定内容123试液消耗氢氧化钠标准溶液的体积，mLV0——空白消耗氢氧化钠标准溶液的体积，mL氢氧化钠标准溶液的浓度mol／mLm样品的质量（℃）x样品中谷氨酸含量（％）样品中谷氨酸含量平均值（g/100mL）相对平均偏差（%）二、中和滴定法测定谷氨酸含量

6.注意事项◆计算结果精确至1位小数。◆滴定法的原理是酸碱滴定：Ｈ＋＋ＯＨ－→Ｈ２Ｏ，如果试样中混有其他酸的Ｈ＋或者其他碱的ＯＨ－，均会影响测定结果同一样品测定结果，相对平均偏差不得超过0.3%。7.思考题■中和滴定法测定谷氨酸含量的操作步骤有哪些？二、中和滴定法测定谷氨酸含量

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