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神经行为毒理学

研究方法张文平山西医科大学毒理教研室2012.9.24前言神经行为毒性的研究方法主要是神经行为测试方法。神经行为毒性是一种非死亡效应。可以用半数效应浓度(Medianeffectconcentration,EC50)和半数抑制浓度(Medianinhibitionconcentration,IC50)来作为神经行为毒性试验常用的参数。半数效应浓度是指能引起50%受试生物或受试者的某种效应发生变化的浓度。半数抑制浓度则是指能引起受试生物或受试者的某种效应50%抑制的浓度。神经行为功能测试的特点在完整机体反复接触低剂量化学物及停止接触后分别测试；方法敏感；主要测定亚临床表现；可定量测定；具有相对特异性；可检测感觉、运动及认识功能。神经行为测试指南1991年，美国环境保护总局(EPA)提出，神经行为测试指南包括行为功能观察、活动度和程序控制行为测定，后又增加发育神经行为毒性测定，包括神经行为功能测定、活动度、听觉惊愕、学习及记忆，必要时应观察神经病理。FDA要求在药物常规检查中加入临床观察。对各种场所如车间接触化学物质的神经行为测试，要求制订化学物质的阈限值（TLV）。第一节动物神经行为毒理的研究方法动物试验的神经行为功能测定方法，分为两级：一级，神经行为功能测试:包括功能测试组合及活动度和反射等测试项目(表21-1),测试方法较为简单；二级，测试有害因素导致的感觉、运动、认知功能变化，测试方法较为复杂。二级神经行为功能测试用于研究有害因素的生物学机理及尚无临床表现的副作用，即亚临床表现或最低副作用的水平，评价特异的感觉、运动及认知功能障碍（表21-2）。动物神经行为一级测试－基本功能观察组合测验动物神经行为二级测试－感觉运动与学习记忆功能测试行为功能测试的动物试验分为两类：即典型(传统)条件反射和操作条件反射。典型条件反射由巴甫洛夫提出，通过先后给予动物条件刺激及非条件刺激使条件反射形成。操作条件反射由斯金纳提出，即本能行为需一定的环境条件制约并保持反应的频率及形式。近年Evans等提出通过本能的、不需要训练的行为进行测试。一、程序控制的行为功能测试方法本类型测试方法包括程序控制行为、听觉功能、本能的或通过学习获得的行为测试方法等。主要用于学习及记忆的测定。这类测试要求动物必须按预置程序操作进行强化。强化方法包括给予动物食物或饮水、电击等以维持动物操作行为控制程序进行。另外，尚有用操作环境中声、光刺激强化者。程序可分为固定程序和非固定程序。固定程序分为固定间期及固定比率。非固定程序分为非固定间期及非固定比率。二、本能的、不需要训练的行为功能测试方法Evans等提出本方法的背景是行为是机体适应环境的表现。适应的行为表示能成功地通过机体的屏障功能等防御机制，使机体免造危害。生物为了适应生存，随环境改变而表现出各种适应功能，即行为改变。本能的行为功能及“非学习”的行为功能与通过实验训练的行为不同。本能的行为表现为掠夺、攻击或惊愕反射等。测试前不需要烦琐的准备工作及训练动物，即不需要人为的干预。为此，试前准备工作简单，试验开始快。如，旷场实验和游泳实验等。三、个体行为功能的研究食物及饮料摄取行为体重活动度步态分析游泳实验震颤及姿势摇摆〕水迷宫试验Morris水迷宫1、试验最长潜伏期设置：60s2、定位航行试验(placenavigationtask,PNT)3、游泳速度(swimvelocity)4、空间搜索试验(spatialprobetask,SPT)5、可视平台试验(visibleplatformtest,VPT)第二节人类神经行为毒理研究方法人类神经行为毒理研究多用神经行为功能测试组合方法。该测试组合方法一般有两类：一是WHO核心测试组合(neurobehavioralcoretestbattery,NCTB)；二是WHO及NIOSH(美国职业安全和卫生研究所)联合提出的计算机化神经行为评价系统（neurobehavioralevaluationsystem,NES）。1984～1987年推出的8套神经行为测试组合二、NCTB神经行为核心测试组合情绪状态测试手提转速度测试目标瞄准追踪测试简单反应时测试数字译码测试视觉保留测试数字广度测试(一)情绪状态测试情绪状态测试（profileofmoodstates,POMS），测定受试者近一周的心境和情感状态。以问卷记录，表上列有65个形容词，分别描述紧张-焦虑、抑郁、愤怒、精力充沛、疲劳和困惑-迷茫6个方