3.2基因工程的基本操作程序 第1课时 基因工程基本操作程序的步骤（一）（教学课件）-高中生物人教版（2019）选择性必修3.pptxVIP

第3章基因工程;抗虫棉能够产生一种毒蛋白，使棉铃虫等害虫瘫痪致死。

毒蛋白的基因来源于苏云金芽孢杆菌，科学家通过基因工程把苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因导入棉花中并成功表达。;第一步：目的基因的筛选和获取

使用限制性核酸内切酶剪切出目的基因;在基因工程的设计和操作中，用于改变受体细胞性状或获得预期表达产物等相关的基因。;思考1：为什么培育转基因抗虫棉用到的目的基因是Bt基因？;思考2：Bt基因的杀虫机理是怎样的？;2、筛选合适的目的基因;（1）利用DNA合成仪人工合成目的基因，适合长度较小的基因。

（2）利用PCR获取和扩增目的基因，既可以扩增已得到的基因或DNA片段，也可以用来扩增很长的DNA分子中的目的基因。用该方法的前提是“要有一段已知目的基因的核苷酸序列”，即要知道目的基因边界的碱基序列作为引物。

（3）通过构建基因文库来获取目的基因，基因文库包括基因组文库（包含了一种生物的所有基因）和cDNA文库（包含了一种生物的部分基因，其基因是通过“反转录法”获得的）。;4、利用PCR获取和扩增目的基因;①反应环境：缓冲溶液，提供合适的酸碱度和某些离子（如Mg2+）。

②DNA母链：含目的基因，提供DNA复制的模板。

③引物：2种，使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸，是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互