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3.2基因工程的基本操作程序;学习目标;1997年,我国政府首次批准商业化种植转基因抗虫棉。到2015年,我国已育成转基因抗虫棉新品种100多个,减少农药用量40万吨,增收节支社会经济效益450亿元。;基因工程的基本操作流程;一、目的基因的筛选与获取;利用PCR技术获取和扩增;C.延伸
温度上升到72℃左右,溶液中的四种脱氧核苷酸在耐高温的DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。;PCR技术是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,利用该方法可以使目的基因迅速扩增,其简要过程如图所示。下列关于PCR技术的叙述,错误的是()
A.PCR和体内DNA复制都需要模板、能量
B.由PCR的反应过程可知,与氢键相比,磷酸二酯键对高温的稳定性更强
C.PCR和体内DNA复制都要消耗4种脱氧核苷酸和2种引物
D.PCR反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板;1.目的:;3.过程:;思考:表达载体为什么一定要有启动子?;1.转化:;农杆菌转化法;基因枪法又称微弹轰击法,是利用压缩气体产生的动力,将包裹在金属颗粒表面的表达载体DNA打入受体细胞中,使目的基因与其整合并表达的方法。;导入动物细胞:;导入微生物细胞:;科学家已能运用基因工程技术,让羊合成并由乳腺分泌抗体,相关叙述中正确的是()
①该技术将导致定向变异
②DNA连接酶能把目的基因与载体黏性末端的碱基对连接起来;
③将目的基因导入受体细胞时采用显微注射技术;
④受精卵是理想的受体
①②④B.①③④
C.②③④D.①②③④;1、检测转基因生物染色体DNA上是否插入了目的基因;如果显示出杂交带,就表明待测样品含有目的基因或目的基因已经转录。;2、检测目的基因是否转录出了mRNA;(二)鉴定;利用人胰岛B细胞构建cDNA文库,然后通过核酸分子杂交技术从中筛选目的基因,筛选过程如下图所示。下列说法不正确的是()
A.cDNA文库的构建需要用到逆转录酶
B.图中的菌落是通过稀释涂布平板法获得的
C.核酸分子杂交的原理是碱基互补配对
D.从该文库中可以筛选到胰高血糖素基因;小结
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