稳定表达FIP1L1-PDGFRA及其突变体细胞株的构建和耐药性评价.docxVIP

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valuatetheiractivitybycheckingtheirresponsestotyrosinekinaseinhibitors(TKIs).MethodsLentivirusinfected

第44卷第1期BasicandClinicalMedicineVol.44No.1

文章编号：1001?6325(2024)01?0063?06

研究论文

稳定表达FIP1L1?PDGFRA及其突变体细胞株的构建和耐药性评价

刘婧雯，宋昊昕，朱蕾?

中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院中国医学科学院医学表观遗传研究中心药理学系，

北京100005

摘要：目的构建能稳定表达FIP1L1?PDGFRA融合基因(F/P)及其T674I和D842V突变体的小鼠原B细胞株

BaF3?F/P、BaF3?F/P?T674I和BaF3?F/P?D842V,并通过考察它们对酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)的响应以评价其活

性。方法用慢病毒感染技术将目的基因导入BaF3细胞；RT?qPCR检测mRNA表达；CCK?8法检测TKIs对稳转细

胞株增殖的抑制作用。结果构建的BaF3?F/P、BaF3?F/P?T674I和BaF3?F/P?D842V细胞株均能转录FIP1L1和

PDGFRAmRNA,并表现出不依赖IL?3增殖的恶性表型特征以及对相应TKIs的敏感性。结论成功构建了能稳定

表达F/P及其T674I、D842V突变体的小鼠原B细胞株，为开发以此为靶点的化合物提供良好的细胞模型。

关键词：FIP1L1?PDGFRA融合基因；基因突变；慢病毒载体；BaF3细胞；慢性嗜酸粒细胞白血病

中图分类号：R967文献标志码：A

DOI:10.16352/j.issn.1001?6325.2024.01.0063

Constructionanddrugresistanceevaluationofcellstrains

whichstablyexpressFIP1L1?PDGFRAproteinanditsmutants

LIUJingwen,SONGHaoxin,ZHULei?

DepartmentofPharmacology,InstituteofBasicMedicalSciencesCAMS,SchoolofBasicMedicinePUMC

MedicalEpigeneticsResearchCenterCAMS,Beijing100005,China

D842Vpre?BcellstrainswhichstablyexpressF/PfusionproteinanditsT674IandD842V

D842Vpre?BcellstrainswhichstablyexpressF/PfusionproteinanditsT674IandD842Vmutantsinordertoe?

andCCK?8methodwasusedtodetecttheinhibitoryeffectofTKIsontheproliferationofstablecellstrains.

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PDGFRAmRNA.TheyexhibitedmalignantphenotypiccharacteristicsofproliferationindependentofIL?3and

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