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切胶纯化蛋白制备方法：一、切胶纯化

1.取250μL包涵体提取液加250μL1*loading，样品梳用胶带全部粘起来留一个marker孔，上样，如果量太大的话可以少上一点，上3*或者4*的loading，这样蛋白可以上的多一些，loading上的少的话可以加一点点甘油，这样上样的时候蛋白就不会飘起来了，按常规方法进行SDS，浓缩胶60V，15min，分离胶90V，90min。观察溴酚蓝距分离胶下沿0.5cm即可停止电泳。电泳毕，将切下的胶放入一干净大平皿中，用适量的0.25mol/L的KCl溶液染色5min；2.用手术刀片小心切下染成银白色的目的带并移入另一平皿中；

用PBS洗3次或用蒸馏水连续冲洗3min后，将胶条移入一干净的小袋中、碾碎（不好碾碎）；

为进一步促进蛋白释放，可-20℃反复冻溶3次以上（冻融次数多，蛋白回收效率高），

约2h后（胶冻上即可）取出，碾碎；继续放-20℃；反复数次。5.3000g,10min离心，取上清,再用0.45um滤膜过滤，测定蛋白浓度，用于免疫小鼠或ELISA包被抗原。