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第2讲微生物的培养技术及应用;考情研读·备考定位;考点一微生物的培养技术及应用;必备知识·夯实基础;几种微生物的营养和能量来源
;2.无菌技术
(1)目的:获得__________________。
(2)关键:__________________。
(3)常见物品的消毒或灭菌方法;①消毒方法及适用对象;②灭菌方法及适用对象;3.微生物的纯培养
酵母菌纯培养的操作步骤:;
;思|维|辨|析
易错整合,判断正误。
(1)微生物在琼脂固体培养基表面或内部生长,可以形成肉眼可见的菌落。()
(2)在培养霉菌时,一般需要将培养基调至中性或弱碱性。()
(3)生物消毒法是指利用生物或其代谢物除去环境中的部分微生物的方法。();(4)倒平板过程中,将培养基倒入培养皿并盖上皿盖后,立即将培养皿倒置。()
(5)培养酵母菌时,可将接种后的平板和一个未接种的平板倒置,放入适宜温度的恒温培养箱中培养24~48h。();延|伸|探|究
下图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图,请分析并回答下列问题:;(1)获得图A效果和图B效果的接种方法分别是什么?
提示:获得图A效果的接种方法为稀释涂布平板法,获得图B效果的接种方法为平板划线法。
(2)某同学在纯化土壤中的细菌时,发现培养基上的菌落连成了一片,最可能的原因是什么?应当怎样操作才可避免此种现象?
提示:最可能的原因是菌液浓度过高或划线时在划下一区域前未将接种环灼烧灭菌;采取的措施是增大稀释倍数或每次划新区域前先将接种环灼烧灭菌。
(3)接种操作为什么一定要在火焰附近进行?
提示:火焰附近存在着无菌区域。
;剖析难点·考点突破;(1)培养基要冷却到50℃左右时开始倒平板。温度过高会烫手,过低培养基又会凝固。
(2)要使锥形瓶的瓶口通过酒精灯火焰。通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。
(3)倒平板时,要用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,不要完全打开,以免杂菌污染培养基。
(4)平板冷凝后,要将平板倒置。因为平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,平板倒置后,既可避免培养基表面的水分过快地挥发,又可防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污??。;2.平板划线法操作步骤;(1)实验成功关键点;(2)操作第一步即取菌种之前以及每次划线之前都需要将接种环进行火焰灼烧灭菌,划线操作结束时,仍需灼烧接种环,每次灼烧的目的不同:;考向一围绕培养基和无菌技术,考查理解能
如表为培养某种微生物的培养基配方,下列相关叙述错误的是();A.依物理性质划分,该培养基属于液体培养基
B.由培养基的原料可知,所培养微生物的同化作用类型是异养型,培养的微生物可以是酵母菌
C.培养基中的唯一碳源是(CH2O),唯一氮源是NaNO3
D.若用该培养基培养纤维素分解菌,则应除去(CH2O),再添加纤维素;解析:由培养基配方可知,该培养基中不含凝固剂,故依物理性质划分,该培养基属于液体培养基,A正确;由培养基的原料可知,(CH2O)属于有机碳源,因此所培养微生物的同化作用类型是异养型,酵母菌是异养型微生物,B正确;碳源是指能为微生物提供碳元素的物质,氮源是指能为微生物提供氮元素的物质,结合培养基配方可知,培养基中的唯一碳源是(CH2O),唯一氮源是NaNO3,C正确;该培养基中含有青霉素,细菌对青霉素敏感,青霉素会抑制细菌的生长,因此若用该培养基培养纤维素分解菌,应除去(CH2O)和青霉素,再添加纤维素,D错误。;〔变式训练1〕根据国家标准(GB19645—2010)每毫升合格的巴氏杀菌乳中细菌总数不得超过50000个。某兴趣小组进行了新鲜牛奶最合适的消毒温度的探究,相关实验操作不合理的是()
A.为了使计数更标准,通常要用同一稀释度下的牛奶接种3个平板,重复计数
B.将等量的新鲜牛奶分别置于60℃、70℃、80℃、90℃恒温水浴锅中处理相同且适宜的时间
C.对处理后的牛奶利用平板划线法进行接种后,在37℃下培养24h,然后计数
D.统计培养基上全部菌落数,不一定以菌落数最少组的处理温度作为最适消毒温度;解析:为了使计数更标准,通常要用同一稀释度下的牛奶接种3个平板,重复计数,然后取平均值,这样可以减小误差,A合理;该实验的自变量是温度,将等量的新鲜牛奶分别置于60℃、70℃、80℃、90℃恒温水浴锅中处理相同且适宜的时间,B合理;对处理后的牛奶进行梯度稀释后,利用涂布法接种平板并在37℃下培养24h,然后计数,C不合理;由于温度过高会影响蛋白质的结构,进而破坏牛奶中的营养成分,所以菌落数最少的组对应的温度不一定是最适的消毒温度,最适的消毒温度应保证每毫升巴氏杀菌乳中细菌总数不得超过50
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