有机高分子基质的填料.pptVIP

a.多孔树脂的IEC填料:柱效、穿透性、分离度、负载量、回收率的性能优异MonoBeads系列：包括MonoQ,MonoS,MonoPSOURCE系列:15Q,15S,30Q,30S贯流色谱填料POROS系列羟基化聚醚凝胶：如TSKgelDEAE-5PW,SP-5PW,CM-5PW等交联聚甲基丙烯酸羟基乙酯:亲水,大孔第32页,共43页，2024年2月25日，星期天b.非多孔树脂的IEC填料:羟基化聚醚,交联聚苯乙烯,交联聚甲基丙烯酸酯,交联琼脂糖等。优点:颗粒小,均匀,刚性好,色谱穿透性强,流速适应范围宽。避免了固相内的吸附与扩散，因此具有高柱效,高分离度和高样品回收率的特点。第33页,共43页，2024年2月25日，星期天c.薄壳型树脂的IEC填料:优点:柱效高,选择性好,分离度高,穿透性好,回收高,流速快等第34页,共43页，2024年2月25日，星期天六、有机高分子类型的疏水HPLC填料

Hydrophobicinteractionchromatography,HICHIC:填料表面具有弱疏水性,蛋白质的疏水基团与填料表面之间产生弱的疏水性相互作用。高浓度盐条件下,蛋白质与疏水固定相的吸附能力高,随着盐浓度的下降,吸附能力下降。当淋洗液离子强度逐渐降低时,蛋白质样品按其疏水性的不同依次被洗脱。第35页,共43页，2024年2月25日，星期天常见淋洗液有(NH4)2SO4,NH4Ac,NaCl,磷酸盐等,其中(NH4)2SO4是最广泛应用的。第36页,共43页，2024年2月25日，星期天疏水色谱HPLC填料一般是亲水性基质,或在合成的非亲水性基质上连接一定的亲水基团，然后引入疏水性基团,主要有丁基、辛基、苯基等以及聚乙二醇。其基质可以是多糖类,也可以是各类高分子多聚物,包括交联聚苯乙烯树脂、硅胶、羟基化聚醚树脂、交联甲基丙烯酸酯类。HIC填料绝大多数是多孔结构,主要是超大孔结构，也可以是非多孔结构的。P206表10-4第37页,共43页，2024年2月25日，星期天七、有机高分子类型的空间排阻HPLC填料

Sizeexclusionchromatography,SECSEC填料特征：填料的性质必须与溶质和淋洗体系相匹配,可以被淋洗剂所浸润；填料和试样尽可能不发生任何基团之间的相互作用,即尽可能避免非空间排阻效应；填料的多孔结构是SEC建立的基础；第38页,共43页，2024年2月25日，星期天SEC填料的色谱特征：除了柱效,选择性,分离度,穿透性等一般色谱表征外,尚需要满足以下指标：排阻极限;分离范围;固流相比第39页,共43页，2024年2月25日，星期天凝胶填料主要类型多糖类传统的软质凝胶:葡聚糖,琼脂糖,聚丙烯酰胺型凝胶高交联的多糖类凝胶:Superdex,Superose,Sephacryl,SepharoseCL高聚物型多孔交联聚甲基丙烯酸酯类树脂,交联聚乙烯醇树脂,亲水化处理的交联聚苯乙烯树脂,羟基化聚醚类.(表10-7P213)第40页,共43页，2024年2月25日，星期天凝胶渗透色谱

Gelpermeationchromatography,GPC有机溶剂为流动相THF四氢呋喃第41页,共43页，2024年2月25日，星期天第42页,共43页，2024年2月25日，星期天感谢大家观看第43页,共43页，2024年2月25日，星期天*DEAE——二乙氨乙基，十八烷基：C18、辛烷基：C8***关于有机高分子基质的填料首先回顾几个问题HPLC方法的主要特点有那些？HPLC的主要设备分哪几部分？第2页,共43页，2024年2月25日，星期天HPLC方法的主要特点分离效率高，选择性好，适于各种多元组分复杂化合物的分离;应用范围广：无机物—有机物，天然物质—合成产物，小分子---大分子，一般化合物到生物活性物质;分离机理各异，色谱柱、淋洗体系和操作参数选择广泛;分离纯化+分析检测;样品量从痕量到大规模制备，实现在线监测和自动化操作。第3页,共43页，2024年2月25日，星期天HPLC的关键设备专用的高压输液系统;高灵敏检测系统;高效分离柱其中分离柱是色谱的中心,是最为关键的部分第4页,共43页，2024年2月25日，星期天与经典色谱的比较第5页,共43页，2024年2月25日，星期天第6页,共43页，2024年2月25日，星期天HPLC分离填料：有机基质多糖型凝胶高聚物树脂无机基质硅胶氧化锆氧化铝多孔玻璃羟基磷灰石石墨化碳黑基质微球——天然多糖或合成单体或交联剂负