青蒿素抑制星形胶质细胞炎症通路的分子机制研究.docxVIP

.1168.中国抗生素杂志2023年10月第48卷第10期

文章编号：1001-8689(2023)10-1168-09

药理与临床

药理与临床

青蒿素抑制星形胶质细胞炎症通路的分子机制研究

张书滔1童宇1郭小岚1陈俊希1许光亚2唐勇3郑露露4时政1,*(1成都大学附属医院/临床医学院，成都610106；2成都大学基础医学院，成都610106；

3成都中医药大学养生康复学院，成都610075；4成都大学食品与生物工程学院，成都610106)

摘要：目的分别以P2X7、外泌体以及瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)为作用靶点，研究青蒿素(ART)抑制星形胶质细胞炎症通路的分子机制。方法培养小鼠原代星形胶质细胞，利用胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光鉴定原代星形胶质细胞的纯度；MTT法检测ART对细胞活性的影响；脂多糖(LPS)处理原代星形胶质细胞，构建细胞炎症模型；分为空白对照组，ART组，外泌体抑制剂组，P2X7受体抑制剂组，TRPV1受体抑制剂组，TRPV1受体激动剂组，通过ELISA法和吸光光度法检测细胞上清液中炎症因子的含量(TNF-α、IL-1β、IL-6及NO)。结果GFAP阳性细胞数达95%表明成功分离培养小鼠原代星形胶质细胞；300ng/mL的LPS处理12h是刺激星形胶质细胞构建炎症模型的最佳浓度和时间；10μmol/mL的ART处理12h可以达到最佳的抗炎效果，并且当浓度小于20μmol/mL时，对细胞活性基本无影响；抑制P2X7受体的表达和外泌体的释放均能降低细胞中炎症因子TNF-α的含量，但不能与ART产生协同降低的效果；抑制TRPV1受体增加了细胞中的TNF-α、IL-1β、IL-6以及NO表达，激活TRPV1受体可降低TNF-α、IL-1β、IL-6以及NO表达，并且ART与TRPV1受体激动剂合用时，能协同降低炎性因子表达。结论青蒿素除了已知的通路发挥其抗炎作用之外，还有可能通过TRPV1通路发挥其抗炎作用。本研究为青蒿素发挥抗炎作用的分子机制提供了新的方向。

关键词：神经炎症；青蒿素；星形胶质细胞；P2X7；外泌体；TRPV1

中图分类号：R285.5文献标志码：A

Thepreliminarymolecularmechanismstudyofartemisinininhibitastrocytesinflammatorypathway

ZhangShutao1,TongYu1,GuoXiaolan1,ChenJunxi1,XuGuangya2,TangYong3,ZhengLulu4,andShiZheng1

(1SchoolofClinicalMedicine,AffiliatedHospitalofChengduUniversity,Chengdu610106;2SchoolofBasicMedicineofChengdu

University,Chengdu610106;3SchoolofHealthandRehabilitationofChengduUniversityofTraditionalChineseMedicine,Chengdu

610075;4CollegeofFoodandBioengineeringofChengduUniversity,Chengdu610106)

AbstractObjectiveToinvestigatethemolecularmechanismofartemisinin(ART)inhibitingtheinflammationpathwayofastrocytesbytargetingP2X7,exosomesandtransientreceptorpotentialvanilicacidsubtype1(TRPV1).MethodsMouseprimaryastrocyteswerecult