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肺炎支原体核酸及耐药突变位点检测试剂盒（荧光PCR法）

说明书

【产品名称】

通用名称:肺炎支原体核酸及耐药突变位点检测试剂盒（荧光PCR法）

【包装规格】

16人份/盒

【预期用途】

本试剂盒用于儿童痰液样本中肺炎支原体及其抗大环内酯类抗生素耐药突变位点即23SrRNA2063(A:G)和

2064(A:G)突变位点的定性检测，可用于肺炎支原体感染及耐药与否的临床辅助诊断。

肺炎支原体可以引起支原体肺炎、上呼吸道感染、支气管炎、肺脓疡、免疫性溶血性贫血、脑膜脑炎、心肌炎、心

包炎、肾炎、社区获得性肺炎等疾病。大环内酯类是治疗肺炎支原体感染的首选药物，临床上，已分离出大环内酯类的

耐药菌株。肺炎支原体耐药株感染患者的发热持续时间、住院时间及给药后发热持续时间均显著长于敏感株感染患者。

[1]大环内酯类药物的结合位点位于23SrRNA结构域Ⅴ，此区域发生的核苷酸点突变会降低抗生素和核糖体之间的亲和

[2][2]

力，从而使肺炎支原体产生耐药性。目前已发现的突变位点包括2063、2064、2067和2617。其中，A2063G表现为

对14-环大环内酯类抗生素耐药，A2064G表现为14-和16-环大环内酯类抗生素耐药，C2617G表现为14-和15-环大环内

A2067G[3]206320642063

酯类抗生素耐药，表现为交沙霉素抗性。中国目前只发现和两个位点的点突变，最常见的是

[1]

位点A到G的突变。根据P1基因限制性片段长度多态性分析，肺炎支原体分为Ⅰ和Ⅱ型，其中Ⅰ型进一步细分为5

种基因亚型（1a-1e），Ⅱ型进一步分为3种亚型（2a-2c）。本产品能检测到肺炎支原体的8个基因亚型。[4]

临床或实验室诊断肺炎支原体检测方法有酶联免疫法和分离培养法，对肺炎支原体耐药突变位点的检测主要采用药

物敏感试验的方法。实验操作人员应接受过基因扩增或分子生物学方法检测的专业培训，具备相关的实验操作资格，实

验室应具备合理的生物安全防备设施及防护程序。

【检验原理】

PCRTaqman

本试剂盒采用聚合酶链式反应（）结合荧光探针技术对人痰液样本中肺炎支原体核酸及其耐药突变位

点进行检测。针对P1基因保守区设计引物探针检测肺炎支原体，探针采用VIC荧光标记；针对23SrRNA基因突变位

点设计引物探针检测A2063G和A2064G突变，探针采用FAM荧光标记；人工合成一段序列作为试剂盒内标，该序列

CY5P1

与已知物种的核苷酸序列无相似性，内标探针采用荧光标记。强阳性质控品和弱阳性质控品，包含基因序列和

23SrRNAA2063G发生突变的基因序列，质控品W包含23SrRNA2063和2064位点均未发生突变的基因序列，不含P1

基因序列。

【主要组成成分】

PCR16/

肺炎支原体核酸及耐药突变位点检测试剂盒（荧光法）（人份盒）包括以下组分：

数量

序号标签成分

16/

（人份盒）

1缓冲液含镁离子、钾离子、dNTPs和Tris等