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分光光度法测定饮料中亚硝酸盐的含量

食品添加剂可以改善食品的味道，有效确保食品的新鲜度，并起到良好的防腐作用。许多食品添加剂都有一定的毒性，亚硝酸盐是其中之一。亚硝酸盐可以抑制某些微生物的生长,防止食品变质，尤其能够抑制肉毒芽抱杆菌的生长和繁殖，从而明显降低肉毒芽泡杆菌的中毒概率

1实验部分

1ess分光光度法

亚硝酸盐分光光度法分析中经典的方法是Griess分光光度法，控制一定酸度下，亚硝酸盐同对氨基苯磺酸反应产生重氮化合物，然后同盐酸蔡乙二胺发生偶合作用，生产紫红色的偶氮化合物

1.2其他磺化酸及乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙酸a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、亚铁氧化钾、乙二胺a.r、乙二胺a.r＞乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.乙二胺a.r＞乙二胺a.r＞乙二胺a.r、乙二胺、乙二胺a.r＞乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺、乙二胺a.r

721分光光度计、电子天平、亚硝酸钠(A.R)、20%盐酸(A.R)、对氨基苯磺酸(A.R)、盐酸蔡乙二胺(A.R)、亚铁氧化钾(A.R)、硼砂(A.R)、乙酸锌(A.R)、各种饮料。

3溶液初滤液的制备

用量筒量取10mL的待测样品置于烧杯中，加入5mL饱和硼砂溶液，12.5mL的亚铁氧化钾溶液利5mL乙酸锌溶液，可看到有沉淀生成，搅拌析出更多沉淀，再加入少量蒸储水搅拌均匀后用玻璃棒引流至500mL的容量瓶中，蒸储水洗涤烧杯3-4次，引流至容量瓶,定容混匀后将其转移至大烧杯中静置30min,待蛋白质完全沉淀，取上层清液抽滤，将30mL的初滤液倒入废液桶，其余滤液存储备用。

2结果与讨论

1亚硝酸钠标准使用液

室温下于100mL容量瓶中，加入2.0mL亚硝酸钠标准溶液，4.0mL对氨基苯磺酸溶液，待其重偶氮化4min后再加入2.0mL2g?L

2.2测定波长的测定

其他条件不变，改变盐酸蔡乙二胺的量分别为L0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0niL测定吸光度,数据见表2。以表2的数据作图，见图1。由图1可知，随着盐酸蔡乙二胺用量的增加，吸光度在增大，并在3.0?6.0mL时逐渐趋于平衡，实验在2.0mL时吸光度最大，因此本文选择盐酸蔡乙二胺加入量为2.0mLo

31对氨基苯磺酸溶液测定结果

其他条件不变,分别加入L0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0niL对氨基苯磺酸溶液,测定吸光度,数据见表3。以表3数据作图，见图2。由图2可知，吸光度随着对氨基苯磺酸用量的增加呈现先增大后降低的趋势，在4.OinL时吸光度最大，因此本文确定对氨基苯磺酸取的用量为4.0mLo

重偶氮化时间对测定吸光度的影响

其他条件不变，改变重偶氮化时间为2,3,4,5,6,7min,测定吸光度，数据见表4。以表4数据作图，见图3。由图3可知，吸光度随着重偶氮化时间的增加先增加后减小。因此本文中选择重偶氮化时间为3mino

市售光度数据

其他条件不变,分别测定显色时间为5,10,15,20,25,30min时的吸光度，数据见表5。以表5数据作图，见图4。由图4可知，吸光度随着时间的增加而增加，且在15min左右吸光度最大，因此本文显色时间确定为15mino

综上，测定条件为538nm波长，控制重偶氮化时间为3min,盐酸蔡乙二胺（2g?L

亚硝酸钠标准使用液

分别吸取0.00,0.20,0.40,0.60,0.80,1.00,1.50,2.00,2.50mL亚硝酸钠标准溶液（相当

于0,1,2,3,5,7,10,12.5ug亚硝酸钠）,测定吸光度，数据见表6。以亚硝酸钠为横坐标,

吸光度为纵坐标，作图，见图5。由图5可知，线性回归方程为y=0.0390x+0.0114,相关系数R

试剂用量的测定

取40.0mL的样液放置于100mL的容量瓶中。按本文确定条件依次加入其它试剂。稀释,定容，测定吸光度，数据见表7。

由表7可知，农夫山泉、雪碧、优酸乳、冰红茶和橙汁中亚硝酸盐含量