（硕士论文小米谷糠肽对秀丽隐杆线虫寿命的影响.pdfVIP

2022

二〇二二年六月

中文摘要

老龄化问题日益突出，多种老年疾病及养老问题给社会增添压力。如何安全有

效地延缓衰老引起人们广泛关注，从食源材料中寻找抗衰老物质具有独特优势。

利用农业副产品生产的多肽具有抗氧化、抗癌、降低高血压等多种生理活性，

为蛋白质资源利用提供新机遇。山西省小米种植面积居全国第一，小米谷糠中蛋白

质含量约12%-15%，氨基酸组成与人体需求高度重合，且含量远高于其他谷类物质，

深度开发小米谷糠功能产品具有重要的社会和经济意义。秀丽隐杆线虫

（Caenorhabditiselegans,C.elegans）通体透明易观察，基因高度保守，是目前衰老

及相关疾病研究常用的模式生物。因此，本实验通过酶解法得到一组抗氧化活性较

高的小米谷糠肽（Milletbranpeptides,MBPE），检测了小米谷糠肽对线虫寿命及运

动能力等多种生理指标的影响，利用qRT-PCR技术，进一步研究了小米谷糠肽延缓

线虫衰老的分子机制。主要研究内容如下：

（1）小米谷糠肽的制备及抗氧化性研究。通过酶法制备小米谷糠肽，利用多

种体外抗氧化实验进行活性测定，结果表明，在碱性蛋白酶添加量为15000U/g时，

水解肽的抗氧化能力最强，DPPH自由基清除率达42.79%，ABTS自由基清除能力

2+

达到61.38%，羟自由基清除率为45.69%，还原力为0.32，Fe螯合能力达到55.85%，

其抗氧化性均显著高于未水解的小米谷糠蛋白。

（2）利用秀丽隐杆线虫研究小米谷糠肽的抗衰老活性。结果表明小米谷糠肽

（浓度分别为6.25μg/mL、12.5μg/mL、25μg/mL、50μg/mL）能有效延长线虫的寿

命，在浓度为12.5μg/mL时效果显著，具有统计学意义。进一步研究发现小米谷糠

肽在不损害线虫生殖能力的前提下，可以改善线虫运动、咽抽能力，提高线虫耐热

激能力和抗氧化能力，从而发挥延缓衰老的作用。

3

（）为了深入研究小米谷糠肽发挥延寿作用的分子机制，测定线虫体内抗氧

化酶活性，并利用qRT-PCR技术分析其对延寿基因表达量的影响。结果发现，小米

谷糠肽可提高线虫体内超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、及谷胱甘肽

（GSH）含量，同时减少丙二醛（MDA）、褐脂质及活性氧（ROS）的积累。qRT-

PCRdaf-16abnormalDAuerFormation-16skn-

结果显示，小米谷糠肽可显著增加（）、

1（SKiNhead-1）的表达量，突变体线虫寿命实验表明，小米谷糠肽对daf-16突变体

(CF1038)和skn-1突变体线虫(EU1)的寿命无明显延长作用，表明小米谷糠肽是通过

I

daf-16和skn-1发挥其抗衰老作用。

综上所述，小米谷糠肽通过调控daf-16、skn-1等基因的表达，从而提高抗氧化

酶活性，增强线虫应激能力，改善一系列生理指标。以上研究为小米谷糠蛋白资源

的开发利用提供理论依据。

小米谷糠肽；抗氧化活性；秀丽隐杆线虫；抗衰老

II

ABSTRACT

Agingproblemisincreasinglyprominent,avarietyofelderlydiseasesandpension

problemsaddpressuretosociety.Howtodelayagingsafelyandeffectivelyhasattracted

widespreadattention,andfindinganti-agingsubstancesfromfoodsource