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发酵工程

一、绪论

1、发酵的概念

传统概念：发酵最初是来自于拉丁语“发泡”，是指酵母作用于果汁或发芽的谷物时产生二氧化碳的现象。

生化和生理学意义的发酵：指微生物在无氧条件下，分解各种有机物质产生能量的一种方式；或者更严格地说，发酵是以有机物作为电子受体的氧化还原产能反应。如葡萄糖在无氧条件下被微生物利用产生酒精并放出CO2。

工业上的发酵：泛指利用生物细胞制造某些产品或净化环境的过程。

狭义：利用微生物在有氧或无氧条件下的生命活动，来制备微生物菌体或其代谢产物的过程。

广义：凡是培养细胞（动、植物和微生物细胞）来制得产品的过程。

2、发酵工程的概念

发酵工程：是应用微生物学等相关的自然科学以及工程学原理，利用微生物等生物细胞进行酶促转化，将原料转化成产品或提供社会性服务的一门科学。

（或它是应用微生物学等相关的自然科学以及工程学原理，利用微生物等生物细胞进行酶促转化，将原料转化成产品或提供社会性服务的一门科学。由于它以培养微生物为主，所以又称为微生物工程。）

3、发酵工程研究的内容

发酵工业用生产菌种的选育：◆自然选育◆诱变育种◆基因工程育种

发酵条件的优化与控制

生物反应器的设计

发酵产物的分离、提取和精制

3、发酵类型

（1）按发酵产品的类型划分

（2）按发酵工艺是否需氧划分

厌氧发酵：如酒类发酵、酒精发酵、丙酮丁醇发酵、乳酸发酵和甲烷发酵

通风发酵：如酵母菌生产、抗生素发酵、有机酸发酵、氨基酸发酵和酶制剂生产等

（3）按发酵工艺培养基的状态划分

固态发酵：发酵是在固体状态下进行。主要应用于传统酿造业。

液态发酵：发酵是在液体状态下进行，是目前发酵工业所采用的主要工艺。

4、发酵工艺培养方法

发酵工艺培养方法有：固态发酵工艺和液态发酵工艺

（1）固态发酵工艺：固态薄层发酵、固态厚层（通风）发酵

（2）液态发酵工艺

液态表面发酵（浅盘发酵）工艺

液态深层通风发酵(Submergedfermentation)液态深层通风发酵是指在无菌条件下，在液体培养基内部进行微生物培养，获得产品的过程。它包括向发酵罐中通入大量无菌空气、搅拌使空气均匀、培养基灭菌和无菌接种。液态深层通风发酵是发酵工业使用的主要工艺。

5、发酵工程基本组成部分？

从广义上讲分为三部分：上游工程、发酵工程、下游工程

6、发酵工业产业化应抓好哪三个环节？

发酵工程产业化就是将有关应用微生物的科学研究成果转化为发酵产品，并投向市场的过程。

三个环节：投产试验、规模化生产和市场营销。

①投产试验：涉及到”上、中、下三游”工作，即研究成果的验证、小试、中试和扩大试验。

②规模化生产：值得注意的是产品质量问题，其检测必须符合相应产品标准。

③市场营销：市场开拓对技术本身影响不大，但参与市场竞争却是产业化成败的决定因素。

7、发酵工业面临问题

①菌种的纯种问题（遗传稳定性，安全，周期短、转化率高产率高，抗污染能力强：噬菌体、蛭弧菌）；

②合适的反应器（基生产规模化，原料利用量大，并且具有一定选择性，节能，结构多样化、操作制动化，节省劳力）；

③基质的选择（价廉，原料利用量大，并且具有一定选择性，易被利用，副产物少，满足工艺要求）。

8、我国发酵工业应该走什么样的产业化道路？发酵过程的组成部分？

答第一步为技术积累阶段、第二步为产业崛起阶段、第三步为持续发展阶段

典型的发酵过程可划分成六个基本组成部分：

（1）繁殖种子和发酵生产所用的培养基组份设定；

（2）培养基、发酵罐及其附属设备的灭菌；

（3）培养出有活性、适量的纯种，接种入生产容器中；

（4）微生物在最适合于产物生长的条件下，在发酵罐中生长；

（5）产物分离和精制；

（6）过程中排出的废弃物的处理。

9、什么叫次级代谢产物？次级代谢产物是微生物在哪些生长时期形成的？其与初级代谢产物有什么关系？

以初级代谢产物为原料通过次级代谢合成的，对自身无明确生理作用的代谢产物叫次级代谢产物。关系：先产生初级代谢产物，后产生次级代谢产物；初级代谢是次级代谢的基础；次级代谢是初级代谢在特定前提下的继续与发展。

二、微生物育种选育

1、菌种分离的一般过程

标本采集→预处理→富集培养→菌种分离（初筛、复筛）→发酵性能鉴定→菌种保藏。

菌种常规分离法：平板划线法、稀释分离法和涂布法。

生化反应分离法：透明圈法、变色圈法、抑菌圈法、生长圈法。

2、微生物纯种分离方法有哪些？

1、固体稀释平皿倾注法（混菌法）最常用的微生物纯种分离方法

2、涂布分离法3、平板划线分离法

4、单细胞挑取法5、组织分离法

6、利用选择培养基分离法7、其他方法

3、富集的目的：让目的微生物在种群中占优势，使筛选变得可能。

富集培养方法：（1）分批式富集培养；（2）恒化