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第二专题酶化学**四、抑制剂对反应速度的影响酶的抑制剂(inhibitor)凡能使酶的催化活性下降而不引起酶蛋白变性的物质统称为酶的抑制剂。区别于酶的变性抑制剂对酶有一定选择性，而变性的因素对酶没有选择性**抑制剂类型和特点竞争性抑制剂可逆抑制剂非竞争性抑制剂反竞争性抑制剂不可逆抑制剂**（一）可逆性抑制作用*概念抑制剂以非共价键与酶或酶-底物复合物可逆性结合，使酶的活性降低或丧失；抑制剂可用透析、超滤等方法除去。竞争性抑制非竞争性抑制反竞争性抑制*类型**1.竞争性抑制作用定义抑制剂与底物的结构相似，能与底物竞争酶的活性中心，从而阻碍酶底物复合物的形成，使酶的活性降低。**(1)竞争性抑制动力学某些抑制剂的化学结构与底物相似，因而能与底物竞争与酶活性中心结合。当抑制剂与活性中心结合后，底物被排斥在反应中心之外，其结果是酶促反应被抑制了。米氏常数变大竞争性抑制通常可以通过增大底物浓度，即提高底物的竞争能力来消除。rmax[S]1/rmax1/r01/r0rmax1/rmaxrmax竞争性抑制的动力学1、Km增大即抑制剂与酶结合后，酶和底物亲和力降低；[I]越高、Km增大。酶和底物亲和力降低，酶反应速度减慢。2、rmax不变3、增大底物浓度，有利于酶和底物结合，可减轻抑制作用；反之，增加抑制剂浓度，加深抑制程度。(2)竞争性抑制作用的机理（1）抑制剂与底物在结构上有类似之处（2）可能结合在底物所结合的位点（如结合基团）上，从而阻断了底物和酶的结合（3）降低酶和底物的亲和力。乙醇作为竞争性底物可以抑制乙二醇氧化成乙醛的反应（因此乙醇可以用于治疗乙二醇中毒）。(3)竞争性抑制作用举例（4）过渡态的类似物作为竞争性的抑制剂所谓过渡态底物是指底物和酶结合成中间复合体后被活化的过渡形式，一般用S*表示，由于其能障小，和酶结合就紧密得多。2.反竞争性抑制抑制剂仅与酶和底物形成的中间产物结合，使ES的量下降。由于所加入的抑制剂能与酶-底物复合物结合，而不与游离酶结合，所以其特征是反应的最大速度比未加抑制剂时反应的最大速度低，当以速度的倒数相对底物浓度的倒数作图，所得图线与未被抑制反应的图线平行。反竞争性抑制动力学曲线(1)反竞争抑制作用动力学加入I时，反而可增加S对E的亲和力，而增加S并不能减轻或消除抑制；有I时，Km减小，说明I可使E对S的亲和力增大。1/r01/rmaxrmax[S]rmaxrmax(2)反竞争性抑制举例单底物酶：芳香基硫酸基的肼解氰化物抑制芳香硫酸酯酶的作用多底物：双底物乒乓机制中，任何一个底物的竞争性抑制剂也是另一底物的反竞争性抑制剂。3.非竞争性抑制抑制剂与酶活性中心外的必需基团结合，底物与抑制剂之间无竞争关系。作用：抑制剂不仅与游离酶结合，也可以与酶-底物复合物结合的一种酶促反应抑制作用。酶-底物-抑制剂复合物（ESI）不能进一步释放出产物。(1)非竞争性抑制动力学酶可同时与底物及抑制剂结合，引起酶分子构象变化，并导至酶活性下降。由于这类物质并不是与底物竞争与活性中心的结合，所以称为非竞争性抑制剂。如某些金属离子（Cu2+、Ag+、Hg2+）以及EDTA等，通常能与酶分子的调控部位中的-SH基团作用，改变酶的空间构象，引起非竞争性抑制。特点：⑴非竞争性抑制剂的化学结构不一定与底物的分子结构类似；⑵底物和抑制剂分别独立地与酶的不同部位相结合；⑶抑制剂对酶与底物的结合无影响，故底物浓度的改变对抑制程度无影响；⑷动力学参数：Km值不变，rmax值降低。第二专题酶化学