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第二专题酶化学**第四节酶促反应动力学**酶促反应动力学研究各种因素对酶促反应速度的影响。影响因素包括有酶浓度、底物浓度、pH、温度、抑制剂、激活剂等。**一、底物浓度的影响1米氏方程2米氏常数的求算**1.米氏方程k1k-1根据稳态近似方法令**若酶的原始浓度为[E]0,反应达稳态后,一部分变为中间化合物[ES],余下的浓度为[E]**k1k-1以r为纵坐标,以[S]为横坐标作图**2.当底物浓度很大时,[S]KM,r=k2[E]0,反应只与酶的浓度有关,而与底物浓度无关,对[S]呈零级。酶催化的反应速率曲线1.当[S]KM时,r=k2[E]0[S]/KM对[S]呈一级。3.当[S]→∞时,r=rm=k2[E]0。当反应速率达到最大值rm的一半时,KM=[S]。**米氏方程****2.求KM和rm以作图,从斜率和截距求出KM和rm**米氏常数Km的意义不同的酶具有不同Km值,它是酶的一个重要的特征物理常数。Km值只是在固定的底物,一定的温度和pH条件下,一定的缓冲体系中测定的,不同条件下具有不同的Km值。Km值表示酶与底物之间的亲和程度:Km值大表示亲和程度小,酶的催化活性低;Km值小表示亲和程度大,酶的催化活性高。**酶的Km在实际应用中的意义鉴定酶:通过测定Km,可鉴别不同来源或相同来源但在不同发育阶段,不同生理状态下催化相同反应的酶是否是属于同一种酶。判断酶的最适底物。(天然底物)计算一定速度下底物浓度。了解酶的底物在体内具有的浓度水平。判断反应方向或趋势。判断抑制类型。**最适pH(optimumpH):酶催化活性最大时的环境pH。0酶活性pH胃蛋白酶淀粉酶胆碱酯酶246810二、pH值的影响第二专题酶化学
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