实验大肠杆菌的培养和分离.ppt

(3)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适当的时间，观察培养基上是否有菌落产生。若固体培养基被细菌污染，在适宜条件下培养一段时间，细菌会大量繁殖，形成菌落，可根据菌落数量的多少判断污染程度。第64页,共78页，2024年2月25日，星期天(4)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，应该采用倒平板培养，并且严格操作、多次重复；保证待测样品稀释的浓度比较合适。(5)对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定。第65页,共78页，2024年2月25日，星期天答案：(1)温度酸碱度(pH)生活周期短(或繁殖快)(2)划线分离涂布分离单菌落(3)培养基上是否有菌落产生(4)D(5)菌落特征第66页,共78页，2024年2月25日，星期天类型三分离以尿素为氮源的微生物【典例3】(2012·浙江高考)幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下：第67页,共78页，2024年2月25日，星期天请回答：(1)在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现色环带。(2)下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是灭菌。A.高压蒸汽B.紫外灯照射C.70%酒精浸泡D.过滤第68页,共78页，2024年2月25日，星期天(3)步骤X表示。在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得菌落。(4)在培养时，需将培养皿倒置并放在中。若不倒置培养，将导致。(5)临床上用14C呼气实验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将14C标记的分解为NH3和14CO2。第69页,共78页，2024年2月25日，星期天【解题指南】解答本题需注意两个方面：(1)细菌和真菌的培养步骤一般为配制培养基、高温灭菌、冷却倒平板、接种、适宜条件下进行培养，依据这一步骤推测X的名称。(2)检测尿素是否分解依据其分解产物呈碱性，用酸碱指示剂酚红检测。第70页,共78页，2024年2月25日，星期天【解析】(1)幽门螺杆菌中含有脲酶，能将尿素分解成为NH3和CO2，故尿素为氮源。NH3为碱性，能使酚红呈红色，故菌落周围会出现红色环带。(2)尿素在高温下分解，故不能用高温灭菌法，只能采取过滤的方法。(3)由细菌和真菌培养操作步骤可知，X为接种。接种时，应将菌种均匀涂布在培养基上。为了获得单菌落，接种前应该稀释菌液。(4)为了形成单菌落还应该将培养皿倒置在恒温箱中培养。(5)用14C标记尿素，分解后标记物全部在CO2中。第71页,共78页，2024年2月25日，星期天答案：(1)脲酶红(2)D(3)接种涂布单(4)恒温培养箱无法形成单菌落(5)尿素第72页,共78页，2024年2月25日，星期天【加固训练】尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，下列是从土壤中分离分解尿素细菌的有关问题，请分析回答：第73页,共78页，2024年2月25日，星期天(1)上图是利用法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步分散到培养基的表面。(2)如果要对培养的菌落进行纯化，在培养基上划线操作中，操作的第一步及每次划线之前都要灼烧接种环，目的是对接种环进行。第74页,共78页，2024年2月25日，星期天(3)下表是一种培养基配方：①制备培养基的操作步骤是()a.倒平板b.计算c.溶化d.称量e.灭菌A.a→b→c→d→e B.e→b→d→c→aC.b→d→c→a→e D.b→d→c→e→a第75页,共78页，2024年2月25日，星期天②该培养基属于培养基(多选)()A.液体B.固体C.鉴定D.选择E.天然③使用该培养基的目的是。④在培养基中加入指示剂，可初步鉴定出该种细菌能分解尿素。(4)在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有(多选)()A.由于土