天然药物化学甾体化合物.ppt

2.不饱和内酯环的反应（α、β－五元不饱和内酯）用于区别甲、乙型强心苷甲型强心苷在碱性醇溶液中双键移位而产生C22活性亚甲基，能与活性亚甲基试剂作用而显色。乙型强心苷不能产生活性亚甲基。第32页,共49页，2024年2月25日，星期天作用于不饱和内酯环的反应（活性次甲基显色反应）反应名称试剂颜色?max(nm)Legal反应亚硝酰铁氰化钠深红或兰470Kedde反应3,5-二硝基苯甲酸深红或红590Raymond反应间-二硝基苯紫红或兰620Baljet反应苦味酸橙或橙红490第33页,共49页，2024年2月25日，星期天①Keller-Kiliani反应：（三氯化铁-冰乙酸试剂）应用对象——具有游离的2-去氧糖、能水解出2-去氧糖的强心苷3.а–去氧糖颜色反应第34页,共49页，2024年2月25日，星期天②对二甲氨基苯甲醛反应：（作为显色剂）样品点于滤纸上，喷试剂，90℃加热30秒，显灰红色斑点（分子中有α-去氧糖即可）试剂——1%对-二甲氨基苯甲醛乙醇液-浓盐酸4:1第35页,共49页，2024年2月25日，星期天③呫吨氢醇（Xanthydrol）反应样品+试剂→水浴加热3分钟→红色试剂——10mg呫吨氢醇溶于100ml冰醋酸，加入1ml浓硫酸只要分子中有α-去氧糖，显红色，该反应极为灵敏，可用于定量分析。④过碘酸-对硝基苯胺反应：（作为显色剂）强心苷+试剂→黄色第36页,共49页，2024年2月25日，星期天六、强心苷的提取和分离植物中所含强心苷类成分复杂，同一药材常含几个乃至几十个性质近似的强心苷，含量较低（1%以下），又常与糖类、色素、皂苷、鞣质等共存，故提取、分离纯化较为困难。另外强心苷易受酸、碱、酶的作用，发生水解、脱水及异构化反应，因此需注意此类因素的影响。注意的问题——防止植物中的酶对成分进行酶解提取原生苷——必须抑制酶的活性，原料要新鲜，采集后低温快速干燥第37页,共49页，2024年2月25日，星期天1.强心苷的提取2.强心苷的分离a.方法：溶剂萃取法、逆流分溶法和色谱分离法。常用70~80%乙醇作溶剂（提取效率高，且可使酶失去活性）b.分离亲脂性单糖苷、次生苷和苷元：一般选用吸附色谱，吸附剂：中性氧化铝、硅胶；展开剂：正己烷-乙酸乙酯、苯、丙酮；c.分离弱亲脂性成分：可用分配色谱。第38页,共49页，2024年2月25日，星期天七、强心苷的检识1.理化检识：甾体母核：Libermann－Burchard反应、Rosen－Heimer反应etc.不饱和内酯环：Legal反应、Kedde反应etc.α-去氧糖：K－K反应、呫吨氢醇反应etc.思考题：如何用化学方法区分强心苷和三萜皂苷第39页,共49页，2024年2月25日，星期天2.色谱检识：①PC:亲脂性较强的强心苷及苷元：固定相:甲酰胺、丙二醇etc.移动相:苯、甲苯etc.亲水性较强的强心苷：固定相：水移动相：水饱和丁酮或乙醇-甲苯-水（4：6：1）第40页,共49页，2024年2月25日，星期天②TLC:吸附TLC多以硅胶为吸附剂，以氯仿-甲醇-冰乙酸（85：13：2）、二氯甲烷-甲醇-甲酰胺（80：19：1）为展开剂。极性较小的苷元及一些单糖苷，亦可用AL2O3、MgO、MgSiO3作吸附剂，以乙醚或氯仿-甲醇（99：1）为展开剂。第41页,共49页，2024年2月25日，星期天分配TLC：常用硅藻土、纤维素作支持剂，以甲酰胺、二甲基甲酰胺、乙二醇等作固定相，氯仿-丙酮（4：1）、氯仿-正丁醇（19：1）等溶剂系统为展开剂。显色剂：1%苦味酸水溶液与10%水溶液（95：5）混合后，喷后于90~100℃烘4~5min，斑点橙红色。分配TLC对分离强心苷的效果较吸附TLC更好，所得斑点集中，承载样品量较大。第42页,共49页，2024年2月25日，星期天八、强心苷的结构研究UV甲型强心苷元：?αβ、-γ-内酯环2