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脑脊液常规检查标准操作手册

1。目的：建立脑脊液常规检查的标准化操作;

2.范围：适用于脑脊液的常规检查(物理检查、蛋白定性、细胞检查）;

3。标本采集：

3。1标本种类：脑脊液，由临床医师进行腰椎穿刺采集，必要时可从小脑延脑池或侧脑室穿刺获得.

3.2标本要求:将脑脊液分别收集于3个无菌试管中，第一管作细菌培养，第二管作化学分析和免疫学检查，第三管作一般性状及显微镜检查.每管收集1-2毫升。

3。3遇高蛋白标本时可采用EDTAK2抗凝。

4.标本储存:立即送检。

5。标本运输：室温运输。

5.标本拒收标准:污染，久置标本。

6。器材试剂：5％苯酚溶液：取纯苯酚25ml，加蒸馏水至500ml，用力振摇，置37℃温箱内1—2天,待完全溶解后，置棕色瓶内保存.细胞计数板;显微镜

7.物理检查：

7。1目测脑脊液颜色与透明度：

（1)观察颜色。(2）观察透明度。

（3）观察凝块或薄膜：收集脑脊液于试管内,静置12-24小时,正常脑脊液不形成薄膜、凝块和沉淀物。

7.2结果判断与分析：

7。2.1颜色：正常脑脊液是无色透明的液体。在病理情况下，脑脊液可呈不同颜色改变：

(1）红色：常由于各种出血引起。脑脊液中出现多量的红细胞,主要由于穿刺损伤出血、蛛网膜下腔或脑室出血引起。前者在留取三管标本时，第一管为血性，以后两管颜色逐渐变淡，红细胞计数结果也依次减少，经离心后上清液呈无色透明.当蛛网膜下腔或脑室出血时,三管呈均匀红色,离心后上清液显淡红色或黄色。红细胞在某些脑脊液中5分钟后，即可出现皱缩现象，因此红细胞皱缩现象不能用以鉴别陈旧性或新鲜出血。

(2)黄色:可因出血、梗阻、郁滞、黄疸等引起。陈旧性蛛网膜下腔或脑室出血，由于红细胞缺乏蛋白质和脂类对膜稳定性的保护，很易破坏、溶解，出血4-8小时即可出现黄色.停止出血后,这种黄色仍可持续3周左右。椎管梗阻如髓外肿瘤，格林—巴利综合征，当脑脊液蛋白质量超过1。5g/L时，颜色变黄，其黄色程度与蛋白质含量呈正比。化脓性脑膜炎、重症结核性脑膜炎时，因脑脊液蛋白质含量明显增加而呈淡黄色或黄色。重症如核黄疸、新生儿溶血病时脑脊液也呈黄染。

（3）白色或灰白色：多因白细胞增加所致常见于化脓性脑膜炎。

（4）褐色或黑色：常见于脑膜黑色素瘤。

7。2。2透明度：正常脑脊液应清晰透明。病毒性脑炎、神经梅毒等疾病的脑脊液也可呈透明外观。脑脊液中白细胞如超过300×106/L时可变为混浊;蛋白质含量增加或含有大量细菌、真菌等也可使其混浊；结核性脑膜炎常呈毛玻璃样微混；而化脓性脑膜炎常呈明显混浊.

填写报告时用“清晰透明、“微浑”、“浑浊”等描述。

7.2.3凝块或薄膜：正常脑脊液不形成薄膜、凝块和沉淀物。若脑脊液内蛋白质包括纤维蛋白质多于10g/L即可出现凝块或沉淀物,结核性脑膜炎的脑脊液静置12—24小时后,可见表面有纤维的网膜形成，取此膜涂片检查结核杆菌，阳性率较高.蛛网膜下隙梗阻时,由于阻塞，远端的脑脊液蛋白质含量常高达15g/L，此时脑脊液呈黄色胶冻状。

填写报告百可用“无凝块”、“有凝块”、“有薄膜”、“胶冻状”等描述。

8。蛋白定性试验(潘氏法)：

8.1实验原理：脑脊液中球蛋白与苯酚结合,可形成不溶性蛋白盐而下沉,产生白色浑浊或沉淀。

8。2试验方法：取潘氏试剂2-3ml于小试管内，用毛细滴管滴入脑脊液1-2滴，衬以黑背景，立即观察结果.

8.3结果判断：

阴性：清晰透明，不显雾状;

极弱阳性（±)：微呈白雾状，在黑色背景下才能看到；

弱阳性（+）：灰白色云雾状;

阳性（+）:白色浑浊；

强阳性（3+)：白色浓絮状沉淀;

最强阳性(4+)：白色凝块;

9.细胞检查：在显微镜下对脑脊液有形成分进行计数和分类检查。

9。1细胞总数：

9。1。1对澄清的脑脊液可混匀后用滴管直接滴入计数池，计数10个大方格内红、白细胞数,其总和即为每μl的细胞数.再换算成每升脑脊液中的细胞数。如细胞较多，可计数一大格内的细胞×10,即得每μl脑脊液中细胞总数。如用升表示，则再乘以106。也可用生理盐水或红细胞稀释液稀释后再用人工计数,或直接用血细胞分析仪进行计数

9。1。2浑浊或带血的脑脊液可用血红蛋白吸管吸取混匀的脑脊液20μl，加入含红细胞稀释液0。38ml的小试管内，混匀后滴入计数池内，用低倍镜计数4个大方格中的细胞总数,乘以50，即为每μ

9。2白细胞数：

9.2.1非血性标本:小试管内放入冰乙酸1—2滴，转动试管,使内壁沾有冰乙酸后倾去之,然后滴加混匀的脑脊液3—

9。2。2

每μl脑脊液内白细胞校正数：

每μl脑脊液内红细胞数×每μl脑脊液内白细胞数

=每μl脑脊液内白细胞未校正数－