2.马铃薯的脱毒程序.ppt

模块Ⅱ马铃薯种苗工厂化生产任务3马铃薯无菌操作与培养2.3.2.1马铃薯的脱毒程序

一、马铃薯为什么要脱毒在马铃薯栽培过程中，出现植株逐年变小、叶片皱缩卷曲、茎秆矮小细弱、块茎变形龟裂、产量逐年下降等现象，就表明马铃薯已经发生退化，种薯退化是引起产量降低和商品性状变差的主要原因。目前，解决马铃薯退化这一问题的有效办法，就是脱除已侵染到块茎中的病毒，使其恢复原有品种的生长特性。

二、马铃薯病毒的种类马铃薯病毒病由多种病毒侵染引起，国际上已报道20多种病毒能够侵染马铃薯。我国发现专门寄生马铃薯的病毒主要有以下几种，分别是：马铃薯X病毒（PVX）、马铃薯Y病毒（PVY）、马铃薯S病毒（PVS）、马铃薯M病毒（PVM）、马铃薯奥古巴花叶病毒（PVMA）、马铃薯A病毒（PVA）、马铃薯卷叶病毒（PLRV）、马铃薯纺锤块茎类病毒（PSTVd）。（一）病毒的种类

不同病毒单独或复合侵染在不同品种上可引起不同症状。马铃薯普通花叶病（PVX）：植株感病后，生长正常，叶片平展，叶片易见黄绿相间的轻花叶。马铃薯重花叶病（PVY）：植株矮小，节间缩短，叶片呈普通花叶状，叶、茎变脆。带毒种薯长出的植株可严重矮化皱缩或出现条纹花叶状，也可隐症。病株薯块变小。马铃薯皱缩花叶病（X、Y）：病株矮化，叶片小而严重皱缩，花叶症严重。表现明显深浅不均的绿色花叶，叶脉和叶柄及茎上有黑褐色坏死斑，病组织变脆。为害严重时，全株发生坏死性叶斑，叶片严重皱缩，自下而上枯死。病株的薯块较小，亦可有坏死斑。马铃薯卷叶病（PLRV）：典型的症状是叶缘向上弯曲，病重时成圆筒状。病株不同程度的矮化，因韧皮部被破坏，在茎的横切面可见黑点，茎基部和节部更为明显。块茎组织表现导管区的网状坏死斑纹。马铃薯纺锤块茎病（PSTVd）：受害植株分枝少而直立，叶片上举，小而脆，常卷曲。靠近茎部，节间缩短，现蕾时明显看出植株生长迟缓，叶色浅，有时发黄，重病株矮化。块茎变小、变长，两端渐尖呈纺锤形。芽眼数增多而突出，周围呈褐色，表皮光滑。（二）不同病毒引起的感病症状

三、马铃薯脱毒程序选取室内培养1－2个月并进行热处理的盆栽马铃薯，采顶芽与侧芽消毒接种。（一）取样与消毒

三、马铃薯脱毒程序（一）取样与消毒消毒方法：取顶芽梢段3－5cm，剥去大叶片，自来水冲洗15min左右，75％酒精浸泡30s左右，用10％次氯酸钠消毒10分钟，最后用无菌水冲洗4－5次。

三、马铃薯脱毒程序（二）茎尖剥离在超净工作台上，借助解剖镜用解剖针仔细剥离幼叶，至出现裸露的生长点，用刀尖切下带1－2个叶原基的生长点，将切下的茎尖转移至培养基上，每瓶接1－2个茎尖。

三、马铃薯脱毒程序（三）茎尖培养培养室进行培养。温度22℃左右，光照2500lx，14h/d。培养2个月左右，在茎尖再生出小绿芽，小的茎尖则需3个月以上。把小绿芽接种到新鲜的MS培养基上，1个月左右生根成为完整植株。在茎尖培养过程中，要根据实际情况，及时更换新鲜培养基，避免茎尖因缺失水分萎蔫。

三、马铃薯脱毒程序(四)脱毒苗鉴定（1）生物学检测法（2）血清学检测法（3）分子生物学鉴定法（4）电镜检测法茎尖脱毒成苗的材料必须经过病毒检测，确定不带病毒后，才能进行快繁种植。进行病毒检测的方法有四种，生物学检测法、血清学检测法、分子生物学鉴定法、电镜检测法。

实训任务任务1：马铃薯茎尖的剥离要求及注意事项：1、学会使用解剖镜2、正确区分茎尖3、消毒过程正确4、无菌操作5、每瓶1个茎尖6、接种室室整洁及打扫（小组照片）

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