化妆品微生物五项检测.ppt

油性样品如何处理稀释液生理盐水-极性溶剂、液体石蜡-非极性溶剂、吐温80-非离子型表面活性剂，分子一端是亲水基团，一端是亲油基团，常用作增溶剂和油/水乳化剂。决定了加入的顺序。问题2第25页,共28页，2024年2月25日，星期天微生物许可检验项目问题3检验项目非特殊用途化妆品特殊用途化妆品育发类染发类烫发类脱毛类美乳类健美类除臭类祛斑类防晒类菌落总数○○○○○○耐热大肠菌群○○○○○○金黄色葡萄球菌○○○○○○铜绿假单胞菌○○○○○○霉菌和酵母菌○○○○○○第26页,共28页，2024年2月25日，星期天④一个样品包装内有两个以上独立小包装或分隔（如粉饼、眼影、腮红等），且只有一个产品名称，原料成分不同的样品，应当分别检验相应项目；非独立小包装或无分隔部分，且各部分除着色剂以外的其他原料成分相同的样品，应当按说明书使用方法确定是否分别进行检验。重点第27页,共28页，2024年2月25日，星期天感谢大家观看第28页,共28页，2024年2月25日，星期天*说明：（1）铜绿假单胞菌为专性需氧菌，能产生绿色水溶性色素，所以在SCDLP中生长在液面，培养基成绿色。（2）氧化酶试验原理：铜绿假单胞菌含有细胞色素氧化酶，该酶是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。具有氧化酶的细菌，首先使细胞色素C氧化，再由氧化型细胞色素C使对苯二胺氧化，生成有色（如粉红色或紫红色）的醌类化合物。（3）绿脓菌素试验原理：铜绿假单胞菌能产生水溶性青脓素和绿脓素，能被氯仿提取；同时能产生红脓素，能溶于盐酸。（4）硝酸盐还原试验原理：铜绿假单胞菌能还原硝酸盐，并将硝酸盐分解产生氮气。（5）42℃生长试验原理：致病性铜绿假单胞菌能在42℃条件下生长，同属的荧光假单胞菌和恶臭假单胞菌都不能生长。（6）明胶液化试验：铜绿假单胞菌含有胶原蛋白酶，能分解明胶，使其液化。*关于化妆品微生物五项检测菌落总数（Aerobicbacterialcount）：化妆品检样经过处理，在一定条件下培养后（如培养基成分、培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等），1g（1mL）检样中所含菌落的总数。所得结果只包括一群本方法规定的条件下生长的嗜中温的需氧性和兼性厌氧菌落总数。菌落总数检验菌落总数的测定便于判明样品被细菌污染的程度，是对样品进行卫生学总评价的综合依据。第2页,共28页，2024年2月25日，星期天48小时出结果（30-300）：测试流程数据处理混合平板的制备细菌的培养检查结果、观察与计数供试液的制备书写检验记录单第3页,共28页，2024年2月25日，星期天为便于区别化妆品中的颗粒与菌落，可在每100mL卵磷脂吐温80营养琼脂中加入1mL0.5％的TTC溶液，如有细菌存在，培养后菌落呈红色，而化妆品的颗粒颜色无变化。TTC亦不可多加会抑制菌落生长第4页,共28页，2024年2月25日，星期天推荐了解：人员培训能力掌握的检验重要指标。有条件可做视具体样品测试结果。在膏霜类化妆品中,微生物都是吸附或附着于颗粒状的原料中,检测时不易洗脱下来,因此,需要验证检测方法的有效性。接种阳性菌计算回收率第5页,共28页，2024年2月25日，星期天未检出2天，检出3-4天耐热大肠菌群Thermotolerantcoliformbacteria系一群需氧及兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌，在44.5℃培养24h—48h能发酵乳糖产酸并产气。该菌主要来自人和温血动物粪便，可作为粪便污染指标来评价化妆品的卫生质量,推断化妆品中有否污染肠道致病菌的可能。耐热大肠菌群

检验操作流程第6页,共28页，2024年2月25日，星期天产酸：黄色产气：气泡产酸产气书写检验记录单不产酸不产气增菌培养供试液的制备配培养基和稀释液检查结果判断44.5±0.5℃24-48h分离培养蛋白胨水培养最终结果判断44.5±0.5℃24±2h靛基质特征菌落36±1℃18~24h双倍胆盐乳糖EMB琼脂液面玫瑰红色紫黑色★粪大肠菌群检查流程图镜检第7页,共28页，2024年2月25日，星期天结果报告根据发酵乳糖产酸产气，平板上有典型菌落，并经证实为革兰氏阴性短杆菌，靛基质试验阳性，则可报告被检样品中检出耐热大肠菌群。第8页,共28页，2024年2月25日，星期天未检出2天，检出4天铜绿假单胞菌（Pseudomonasaeruginosa）属于假单胞菌属，为革兰氏