Western-blotting 技术鉴定人血清免疫球蛋白lgG分子实验报告.pdfVIP

Western-blotting技术鉴定人血清免疫球蛋白lgG

摘要：本实验利用Western-blotting技术鉴定人血清免疫球蛋白lgG，主要包括利用SDS进行蛋白

质分离之后，将其转移至NC膜上进行蛋白免疫迹并进行检测，实验中我们用了正常人血清蛋白，肺炎患

者，白血病人患者三种血清，使用彩虹Marer，并用其作出标准曲线，以此求出其余IgG的分子质量，并

根据不同样本条带颜色，面积等简要判断不同样本LgG含量的多少并给予解释。

关键词：免疫迹技术；免疫球蛋白；SDS

引言：蛋白质免疫印迹技术,是1979年斯坦福大学乔治.斯塔克发明的蛋白质

迹法,继southern-blotting之后起名Western-blotting,是分子生物学、生物

化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法,广泛应用于基因在蛋白水平的表达研

究,抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面，是一种将高分辨率凝胶电泳和免

疫化学分析技术相结合的杂交技术，其分析容量大，敏感度高，特异性强，是检

测蛋白质性质、表达与分布的一种最常用的方法。

聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构，具有分子筛效应，蛋白在其中依三种因素

分开：蛋白大小，形状和电荷。SDS是阴离子去污剂，作为变性剂和助溶试剂，

它能断裂分子内和分子间的氢键，使其去折叠。聚丙稀酰胺