(2)--1.3 植物组织培养的基本原理.ppt

植物组织培养的基本原理

目录2.愈伤组织的形成1.细胞全能性及其表达

一、细胞全能性及其表达

§1细胞全能性及其表达一、植物的再生现象sexualreproduction：经雌、雄配子的结合，形成合子。合子经过有丝分裂发育成胚，胚经过细胞分裂和分化而形成器官。再通过各部器官的发育，最终形成具有完整结构的植物体。asexualreproduction：不经过雌、雄配子的结合，而是用其母体的一部分来进行繁殖。如大蒜的分瓣繁殖、马铃薯的茎芽繁殖、草莓的扦插繁殖、葡萄的压条繁殖和枣树的断根繁殖等都是无性繁殖。

二、植物细胞全能性（totipotency）的概念（一）发展在自然界再生作用的启迪下，1902年德国植物学家Haberlandt根据细胞理论，大胆地提出：高等植物的器官和组织，可以不断的分割，直至单个细胞的观点。并且预言，植物的每个细胞都具有形成完整植株所需要的全套基因。§1细胞全能性及其表达

1958年，英国科学家Steward等用胡萝卜根的愈伤组织细胞进行液体振荡悬浮培养，并成功地诱导单个细胞的悬浮细胞发育为成熟的胚胎，完全证明了Haberlandt提出的细胞全能性学说。

二、植物细胞全能性（totipotency）的概念（二）含义一个生活的植物细胞，无论是体细胞还是生殖细胞，只要有完整的膜系统和细胞核，它就会有一整套发育成一个完整植株的遗传基础，即均具有该物种全部的遗传信息。每个植物细胞均具有发育成完整植物体的潜在能力。§1细胞全能性及其表达

二、植物细胞全能性（totipotency）的概念（三）思考问题的提出：1、为什么在自然状态下，生物体内的细胞为什么没有表现出全能性，而是分化成不同的组织器官？2、激发潜在全能性的条件？§1细胞全能性及其表达

1、为什么在自然状态下，生物体内的细胞为什么没有表现出全能性，而是分化成不同的组织器官？

从理论上讲，只要是一个生活的细胞，都有再生出一个完整植株的潜力，但实际情况并非如此简单。在自然状态下，由于细胞在植物体内所处位置及生理条件的不同，它的分化受到各方面的调控，致使其所具有的遗传信息不能全部表达出来，致使其某些功能被抑制（suppressed），所以只能形成某种特化细胞，构成植物体的一种组织或一个器官的一部分。

实践的证明：其次，植物组织培养的大量实践告诉我们，并不是植物体内的每一个细胞都具有全能性。就目前所知，细胞的再生潜力与其分化程度呈负相关，就是说细胞分化程度越高其再生能力越低。一般来说，高度分化或特化的细胞，例如筛管细胞和根冠细胞，已经失去了分裂和再分化的能力，即使在离体培养的条件下，也不可能发育成植株。但也有人认为细胞的再生能力与其分化程度无关，只是人们现在还没能完全掌握细胞分化的机制。虽然还没有完全从理论上揭示其原因，但事实是越老的细胞，其基因的表达就越受到严格的制约，或者说丧失功能或不表现功能的基因越多，所以应尽量选取幼嫩的植物组织作为培养的实验材料。

2、激发潜在全能性的条件？

总而言之，全能性只是一种可能性，要把这种可能性变为现实性必须满足两个条件：一是要把这些细胞从植物体其余部分的抑制型影响下解脱出来，也就是说必须使这部分细胞处于离体的条件下；二是要给予它们适当的刺激，即给予它们一定的营养物质，并使它们受到一定的激素的作用。同时也证明离体培养技术在实现植物细胞全能性中的重要作用。离体培养技术的作用在于离体状态下的植物细胞，通过理化因子的人工调控而发育成完整的植株。从而使植物固有的潜在能力得以充分表达。创伤+激素

三、植物细胞的分化、脱分化和再分化（一）植物细胞分化1、定义：分化（differentiation）：是指植物体各个部分出现异质性的现象，体现在细胞分化、组织分化、器官分化三个水平上。细胞分化：指导致细胞形成不同结构，引起功能改变或潜在的发育方式改变的过程。是基因选择性活化或阻遏的结果。细胞分化是组织分化和器官分化的基础，是离体培养再分化和植株再生得以实现的基础。§1细胞全能性及其表达

（二）脱分化（Dedifferentiation）1、定义：也称去分化，一个成熟细胞转变为分生组织状态或胚性细胞状态的过程就是细胞脱分化。如叶柄基部的薄壁细胞成为离层细胞；伤害导致局部细胞形成愈伤组织。

2、胚性细胞——植物的干细胞

（1）定义：胚性细胞（embryoniccells）一词最早见于在20世纪80年代植物组织培养的文献中，其含义与近年来动物细胞学家提出的胚胎干细胞（stemcell,SE）基本相同。由胚胎内细胞团或原始生殖细胞经体外抑制培养而筛选出的细胞，具有发育全能性。（二）脱分化（Dedifferentiation）

合子毫无疑问，被子植物的合子是胚性